操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Cell Viability Detection Kit | 500T|1000T | FS-X9603 |
產(chǎn)品介紹:
我司細(xì)胞活力檢測試劑盒提供了一種可靠、靈敏、安全和低成本的快速有效檢測細(xì)胞活力與毒性的方法。本產(chǎn)品利用靈敏的易被氧化還原的物質(zhì)通過在細(xì)胞生長的培養(yǎng)基中所產(chǎn)生的化學(xué)還原反應(yīng),將非熒光信號的染料轉(zhuǎn)換成為紅色熒光物質(zhì),從而檢測細(xì)胞的存活率。該熒光信號可以用530nm 的激發(fā)波激發(fā),在590nm 處可以獲發(fā)射波。檢測所產(chǎn)生的熒光信號是與樣品中的活細(xì)胞數(shù)成正比的。根據(jù)不同類型的細(xì)胞,本試劑盒可以檢測到至少40 個(gè)細(xì)胞/孔,同時(shí)保證很好的重現(xiàn)性和靈敏度。 操作說明 以下操作可用作通用指導(dǎo)建議??紤]不同細(xì)胞類型與培養(yǎng)條件的差異性,有必要根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化您的操作步驟。 1.96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板每孔100μL 培養(yǎng)基飼養(yǎng)細(xì)胞,控制細(xì)胞數(shù)目在40~10000 個(gè)/貼壁細(xì)胞,2000~500000 個(gè)/懸浮細(xì)胞。設(shè)置空培養(yǎng)基做對照。 2.加入10μL 檢測液至培養(yǎng)基中,37 度避光孵育5-6 小時(shí)。 3.熒光微孔板讀數(shù)530nm 激發(fā),590nm 發(fā)射波讀數(shù)。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
間皮su(MSLN)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MSLN ELISA Kit,MSLN,
肌球蛋白輕鏈(MLC)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MLC ELISA Kit,MLC,
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SDF-1β ELISA Kit,SDF-1β,
黑色su濃縮激su(MCH)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MCH ELISA Kit,MCH,
胱天蛋白mei8(Caspase-8)elisa檢測試劑盒 英文名稱:Caspase-8 ELISA Kit,Caspase-8,
谷氨suan脫羧mei自身抗體(GAD-Ab)elisa檢測試劑盒 英文名稱:GAD-Ab ELISA Kit,GAD-Ab,
桿狀病毒IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:BIRC2/3 ELISA Kit,BIRC2/3,
富組蛋白(HTN5)elisa檢測試劑盒 英文名稱:HTN5 ELISA Kit,HTN5,
泛su分解mei(DUB)elisa檢測試劑盒 英文名稱:DUB ELISA Kit,DUB,
毒蕈型乙酰受體亞型M3(M-AChR M3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:M-AChR M3 ELISA Kit,M-AChR M3,
蛋白mei3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PR3-ANCA ELISA Kit,PR3-ANCA,
親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PPIA/CYPA ELISA Kit,PPIA/CYPA,
Ⅹ(FⅩ)elisa檢測試劑盒 英文名稱:FⅩ ELISA Kit,F(xiàn)Ⅹ,
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:GLUT1 ELISA Kit,GLUT1,
鳥氨suan氨基jia酰轉(zhuǎn)移mei(OCT)elisa檢測試劑盒 英文名稱:OCT ELISA Kit,OCT,
膜聯(lián)蛋白Ⅳ(ANX-Ⅳ)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ANX-Ⅳ ELISA Kit,ANX-Ⅳ,
lv離子胞內(nèi)通道蛋白4(CLIC4)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CLIC4 ELISA Kit,CLIC4,
細(xì)胞活力檢測試劑盒(96孔熒光計(jì))孕tong標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Progesterone
甜菊糖標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg 英文名稱:Stevioside
多庫脂鈉標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Docusate Sodium
磺an二jia嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Sulfamethazine
磺舒標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Probenecid
水楊suan毒扁豆標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Physostigmine Salicylate
炔雌chun標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱:Ethinyl Estradiol
丙二chun標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1ml 英文名稱:Propylene Glycol
jia丙氨酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Meprobamate CIV
蔗糖標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Sucrose