ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | FMOD人纖調(diào)蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human fibromodulin, FMOD Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H64365 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ) 規(guī)格:20mg 英文:TIMP2
再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ) 規(guī)格:20mg 英文:TIMP1
再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ) 規(guī)格:10mg 英文:CTSZ
再生蛋白1(NEO1) 規(guī)格:20mg 英文:CTSW
有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1) 規(guī)格:1g 英文:CTSV
存活素(Surv) 規(guī)格:20mg 英文:CTSO
存活素(Surv) 規(guī)格:20mg 英文:CTSL3
死亡因子4(MORF4) 規(guī)格:10mg 英文:CTSL
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶1(DAPK1) 規(guī)格:20mg 英文:CTSK
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶1(DAPK1) 規(guī)格:20mg 英文:CTSG
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3) 規(guī)格:1g 英文:CTSF
死亡誘導(dǎo)終結(jié)因子1(DIDO1) 規(guī)格:20mg 英文:CTSD
死亡誘導(dǎo)終結(jié)因子1(DIDO1) 規(guī)格:10mg 英文:CTSA
死骨片1(SQSTM1) 規(guī)格:1g 英文:HAT1
成肌分化蛋白(MyoD) 規(guī)格:20mg 英文:HDAC9
Loureirin B雷米普利(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C17H14O6 性狀:Yellow powder 純度:98.0%
4,2'-Dihydroxy-4'-methoxychalcone 分子式:C33H40O21 性狀:Yellow powder 純度:98.5%
Glabralide A(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C35H36O14 純度:97.0%
AureusidinN-乙酰神經(jīng)氨/唾液 分子式:C32H22O10 性狀:Yellow powder 純度:98.0%
Isoliquiritigenin紅霉素 分子式:C33H24O10 性狀:Yellow powder 純度:97.5%
Phloretin紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) 分子式:C39H32O14 性狀:Yellow powder 純度:97.0%
Helichrysetin鹽多巴酚丁胺 分子式:C21H20O12 性狀:Yellow powder 純度:98.0%
Sappanchalcone羥丙基β環(huán)糊精;2-羥丙基-β-環(huán)糊精 分子式:C27H30O17 性狀:Yellow powder 純度:98.0%
Robtein羧甲基殼聚糖 分子式:C30H34O5 性狀:Yellow powder 純度:96.0%
鐵冬青;毛冬青 Rotundic acid; hairy holly acid 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷 Emodin -8-O- beta -D- glucoside 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
洋川芎內(nèi)酯A Senkyunolide A 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
洋川芎內(nèi)酯H Senkyunolide H 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
洋川芎內(nèi)酯I Senkyunolide I 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
正丁基酞 Butyl phthalide 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
異蓮心 Isoliensinine 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
甲基蓮心 Neferine 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
蓮心高鹽 Liensinine perchlorate 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
知母皂苷AⅢ Timosaponin A III 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
知母皂苷B II Saab B II 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
知母皂苷元;菝葜皂苷元; 菝葜皂甙元 Sarsasapogenin; sarsasapogenine; sarsasapogenin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
FMOD人纖調(diào)蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理巨噬炎性蛋白抗體Porcine PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) ELISA Kit
CD72蛋白抗體Porcine ODF (Osteoclast Differentiation Factor) ELISA Kit
中心體蛋白128抗體Porcine MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit
著絲粒蛋白O抗體Porcine SDC4 (Syndecan 4) ELISA Kit
3號(hào)染色體開放閱讀框17抗體Porcine S100A13 (S100 Calcium Binding Protein A13) ELISA Kit
質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體Porcine MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit
磷化質(zhì)膜微囊蛋白-2抗體Porcine PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit
3號(hào)染色體開放閱讀框24抗體Porcine IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)