公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | HCG人絨毛膜促性腺激素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Chorionic Gonadotrophin, HCG Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63667 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
Staphylococcus epidermidis 表皮葡萄球菌Staphylococcus epidermidis凍干管、試管斜面安全等級(jí):1模式菌株:no研究;教學(xué);分類。檢定慶大霉素效價(jià),《GB 4789.28 培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》標(biāo)準(zhǔn)菌株。營(yíng)養(yǎng)瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾 1.0L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。生長(zhǎng)條件:37℃,好氧。生長(zhǎng)特性革蘭氏染色陽(yáng)性。球狀,直徑0.5-1.5μm。單個(gè)、成對(duì)排列及具特征性的多于一個(gè)平面分裂,形成不規(guī)則的堆團(tuán)。不運(yùn)動(dòng)。壁含有兩種主要成分:肽聚糖和與它相的磷壁質(zhì)?;墚愷B(yǎng)菌,呼吸代謝和發(fā)酵代謝。產(chǎn)生觸酶。產(chǎn)生外酶和素。兼性厭氧。適生長(zhǎng)溫度為35-40℃。主要與皮膚、皮膚腺體和溫血?jiǎng)游锏恼衬び校闹鞣秶鷱V泛。潛在的致病菌。存儲(chǔ)條件:4℃,避光冷藏 純度:98%,含500ppm氫醌單甲醚MEHQ穩(wěn)定劑
Streptomyces│venezuelae 委內(nèi)瑞拉鏈霉菌Streptomyces│venezuelae斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)生Chloramphenicol霉素CM0012生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98%,含500ppm氫醌單甲醚MEHQ穩(wěn)定劑
Micrococcus luus 藤黃微球菌Micrococcus luus凍干管、試管斜面安全等級(jí):2模式菌株:no研究;教學(xué);分類。抗生素效價(jià)測(cè)定。《中華人民共和國(guó)藥典》抗生素微生物檢定法。營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。生長(zhǎng)條件:37℃,好氧生長(zhǎng)特性革蘭氏陽(yáng)性;球狀,成堆或四聯(lián)排列,直徑1.0-2.0μm、不生芽孢;菌落呈黃色,不透明,有光澤,邊緣較圓整,表面光滑,化能異養(yǎng)菌,代謝為嚴(yán)格的呼吸型。產(chǎn)生觸媒。好氧。存儲(chǔ)條件:4℃,避光冷藏 純度:97%
Streptomyces│lavendulae 淡紫灰鏈霉菌Streptomyces│lavendulae斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:noCM0039生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:97%
Campylobacr│jejuni 空腸彎曲桿菌Campylobacr│jejuni分離基物:雞盲腸凍結(jié)物安全等級(jí):2模式菌株:no科研教學(xué)0生長(zhǎng)條件:42存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度:97%
Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis 伊尼奧單孢菌澄江變種Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)生Sisomicin(西梭米星)CM0012生長(zhǎng)條件:35-37C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98%
Micromonospora│inyoensis 伊紐單孢菌Micromonospora│inyoensis斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)生Sisomycin紫蘇霉素CM0271生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98%
Streptomyces│paradoxus 意外鏈霉菌Streptomyces│paradoxus分離基物:土壤凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no抗草分枝桿菌CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:97%
HCG人絨毛膜促性腺激素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理MTHFR 亞甲基四氫葉還原酶MTHFR抗體3,5-二甲氧基苯甲甲酯Human RIPK2 (Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit
MTNR1A/MTR-1A 褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體3,5-二甲氧基苯甲甲酯Human TNK2 (Tyrosine Kinase, Non Receptor 2) ELISA Kit
MTNR1B 褪黑素受體1B抗體3,5-二甲氧基苯甲甲酯Human DAF (Decay Accelerating Factor) ELISA Kit
MLN 胃動(dòng)素抗體異戊3,4-二甲氧基苯甲甲酯Human STK39 (Serine/Threonine Kinase 39) ELISA Kit
mTOR 雷帕霉素靶蛋白抗體苯3,4-二甲氧基苯甲甲酯Human PRSS (Serine Protease) ELISA Kit
Phospho-mTOR (Ser2448) 磷化雷帕霉素靶蛋白抗體司可鈉3,5-二羥基苯甲甲酯Human TNNI3K (Serine/threonine-protein kinase TNNI3K) ELISA Kit
Phospho-mTOR (Ser2481) 磷化雷帕霉素靶蛋白抗體那可丁3,5-二羥基苯甲甲酯Human MAP2K6/MKK6 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 6) ELISA Kit
MTLR 胃動(dòng)素受體抗體硝西泮2,5-二羥基苯甲甲酯Human MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit