公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠淋巴瘤細(xì)胞;EL-4EL4 | 貨號(hào) | AXB10530 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | EL-4EL4：EL4EL4 |
分類 | 小鼠系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
別稱 | EL-4 |
種屬 | 小鼠 |
年齡（性別） | 不詳 |
組織來源 | T淋巴細(xì)胞；淋巴瘤 |
生長(zhǎng)特性 | 懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
詳情簡(jiǎn)介 | EL4細(xì)胞是從用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽在C57BL小鼠中誘導(dǎo)的淋巴瘤中建立的。EL4細(xì)胞能抗0.1mM氫化，對(duì)20mcg/ml PHA敏感。EL4細(xì)胞還有一個(gè)亞株(EL4.IL-2)可以生成高水平的IL-2。 |
生物安全等級(jí) | 1 |
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | DMEM＋10% HS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 3×10^5-5×10^5cells/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
抗原表達(dá)情況 | H-2b; Thy-1.2 |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
6號(hào)染色體開放閱讀框64抗體甲基化組蛋白H3(mono methyl K79)單克隆抗體 英文名；Histone H3(mono methyl K79)
6號(hào)染色體開放閱讀框70抗體甲基化組蛋白H3(mono methyl K9)單克隆抗體 英文名；Histone H3 (mono methyl K9)
6號(hào)染色體開放閱讀框72抗體甲基化組蛋白H3(tri methyl K4)單克隆抗體 英文名；Histone H3 (tri methyl K4)
6號(hào)染色體開放閱讀框81抗體甲基化組蛋白H3(Tri methyl K79)單克隆抗體 英文名；Histone H3 (tri methyl K79)
6號(hào)染色體開放閱讀框93抗體甲基化組蛋白H3(tri methyl K9)單克隆抗體 英文名；Histone H3 (tri methyl K9)
6號(hào)染色體開放閱讀框97抗體甲基雙加氧酶TET2抗體 英文名；TET2
6號(hào)染色體開放閱讀框抗體甲基樣蛋白15抗體 英文名；METTL15/METT5D1
6-磷酸果糖激酶C單克隆抗體甲基樣蛋白16抗體 英文名；METT10D
6-磷酸果糖激酶C抗體甲基轉(zhuǎn)移酶cyt-19抗體 英文名；CYT 19
6型膠原蛋白α5抗體甲基轉(zhuǎn)移酶NSUN5抗體 英文名；NSUN5
7號(hào)染色體開放閱讀框10抗體甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白10抗體 英文名；Methyltransferase like 10
小鼠淋巴瘤細(xì)胞;EL-4EL47號(hào)染色體開放閱讀框13抗體甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白14抗體 英文名；METTL14
7號(hào)染色體開放閱讀框16抗體甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白3抗體 英文名；METTL3
7號(hào)染色體開放閱讀框25抗體甲精結(jié)合蛋白17抗體 英文名；FBP17
