細胞名稱 小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亞克隆14(ATCC CRL-2594)在抗壞血酸和3到4mM無機磷酸鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細胞分化。 它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質(ECM)。MC3T3亞克隆24(ATCC CRL-2594)和MC3T3亞克隆30(ATCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細胞分化
培養(yǎng)條件 α-MEM:Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(15+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
(S)-(-)-4-吡咯完酮-5-羧酸,英文名或英文縮寫:L-Pyroglutamic acid,級別:BR,99%,規(guī)格:10克
53-84-9*腺嘌呤雙核苷酸BETA-NICOTINAMIDE ADENINE DINUCLEOTIDE
AGAROSEBLENDERS-TBEBLEND1.0%瓊脂糖 - TBE 混合物 1.0%生物技術級白色粉末RTsigma
米吐爾 Metol,99.0% 55-55-0 25G 通用試劑
gamma-務內酯 gcmmc-Vclqrolcctonq 108-9-
棉藍,英文名或英文縮寫:metxyl blue,級別:IND,規(guī)格:5克
513-92-8四代TETRAIODOetxylENE
6-Chloropyridin-2-ylboronic acid 870459-91-9
棕櫚酸甲酯 Methyl palmitate,≥99% 112-39-0 5G 通用試劑
LevineEMB瓊脂 Nc
紫脲酸20毫升
36404-88-32-錄-3-甲醛2-Chloro-3-pyridinecarboxaldehyde
shēng huà shì jì容量:500克
2,4-二安基本磺醋 2,4-Dicminobqnzqnqsulfonic ccid 88-63-1
移液器P50shēng huà shì jì容量:1克
小鼠成纖維細胞(EGFP標記)
ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM-2 / CD102 人細胞裂解液 (陽性對照)
人間充質干細胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg
FC33細胞,Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞 小鼠垂體細胞,MPC細胞 人臍動脈內皮細胞
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
hCD133+-CB-c pooled 從臍帶血提取的人類CD133+祖細胞(hCD134+-CB),混合來源 100000 大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc
人表皮角質細胞-(HEK-a) ( 5×105 )
人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292
大鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs)
人鼻咽癌細胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質瘤細胞
IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14培養(yǎng)NIH/3T3(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2
Sars結構蛋白表達株;293sars181A
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CNE1-lmpl細胞,轉基因鼻咽癌細胞系 小鼠黑色素瘤細胞,B16F1細胞 CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
少突膠質細胞培養(yǎng)基OM-prf
Promocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml