改良茜素紅S法鈣鹽染色試劑盒150ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
改良茜素紅S法鈣鹽染色試劑盒150ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
改良茜素紅S法鈣鹽染色試劑盒150ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補加200μL的1×Binding Buffer。
FaDu(人咽鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H058人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Colo205細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞,A-204細(xì)胞 人正常肝細(xì)胞;L-02
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM933
BMP2 Others Human 人 BMP-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5
IL10RB Others Rat 大鼠 IL10RB / IL10R2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
B16F10細(xì)胞,小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞) SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CTSB Others Mouse 小鼠 Cathepsin-B / CTSB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞cDNAHBdSF cDNA
3T3? 成纖維細(xì)胞
CL-0255A875(人黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞
人胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293 人腎管狀上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生成素4(ANG-4)免疫試劑盒 Human Angiopoietin 4 ELISA Kit
人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒 ,英文名: SLA ELISA Kit
RatInterleukin1β,IL-1βELISA試劑盒大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglucoseoxidase,GODELISA試劑盒人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humaninterleukinreceptorassociatedkinase,IRAKELISAKit人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human serine protease (PRSS) ELISA Kit 人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒
HumanAbnormalprothrombin,APISAKit 人異常*原(APT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISA試劑盒人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葉片葉綠體粗提分離試劑盒20次
Humantissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝