試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務:
我們可以根據您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產品名稱 | 人血管生成素1(ANG-1)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit |
貨號 | YS-H12506 |
?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
分泌粒蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SCG3
分選連接蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SNX6
絲氨酸蛋白酶14/膜型絲氨酸蛋白酶1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:ST14
轉錄因子SOX17抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SOX17
內質網脂質轉運相關蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SPFH2
微管蛋白γ/Tubulin γ抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:gamma tubulin (Centrosome Marker )
血小板反應蛋白2/凝血酶敏感蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Thrombospondin 2
環(huán)指蛋白調節(jié)蛋白激酶C蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:TRIM41
環(huán)指蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:RNF9
四分子交聯體5抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:TSPAN5
髓系細胞觸發(fā)受體樣轉錄因子2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:TREML2
磷酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Tau protein(Thr522)
端粒酶結合蛋白P23抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Telomerase Binding Protein, P23
核蛋白95抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:UHRF1
人血管生成素1(ANG-1)ELISA檢測試劑盒益母草堿;Leonurine hyd 24697-74-3 規(guī)格: 20mg
育亨賓;Yohimbine hydr 65-19-0 規(guī)格: 20mg
Α-香樹脂;α-Amyrene 20248-08-2 規(guī)格: 20mg
烏藥環(huán)甲;Methyllind 3984-73-4 規(guī)格: 20mg
檀香醇;Santalol 11031-45-1 規(guī)格: 20mg
四氫黃連堿;Tetrahydrocopt 規(guī)格: 20mg
苑子苷A;Complanatoside 146501-37-3 規(guī)格: 20mg
石杉堿甲;(-)-Huperzine A 102518-79-6 規(guī)格: 20mg
人參二醇;Panaxadiol 19666-76-3 規(guī)格: 20mg
羥基酪醇;3,4-Dihydroxyph 10597-60-1 規(guī)格: 50mg
奇壬醇;kirel 52659-56-0 規(guī)格: 20mg
歐當歸內酯A;Levistilide A 88182-33-6 規(guī)格: 20mg
馬來酸;Maleic acid 110-16-7 規(guī)格: 20mg
馬錢苷;Loganin 1852-94-2 規(guī)格: 20mg
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。