【運(yùn)輸及保存】
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
【自備試劑】
一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【使用方法】
一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA ,也可以另購本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA 段作為陽性對照。使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分 在專門的區(qū)域操作。 ?
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50次 |
貨號 | BJP6980 |
訂購流程:
通過在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
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實(shí)驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
【參考值(參考范圍)】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測,如重復(fù)實(shí)驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。
Phospho-cdc2 (Thr161) 英文名稱: 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml
Anti-BOb-1 B細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-6 人白介素-6Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CGB 嗜鉻粒素B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NUP54 NUP54抗體 規(guī)格 0.2ml
BCA(bicinchoninic acid) BCA蛋白濃度測定試劑盒 60ml
TCF3 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子3抗體(螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47) 0.2ml
AF10 英文名稱: 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體 0.1ml
Anti-CBL2 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AcSDKP(Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 小鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CCL17/TARC/FITC 熒光素標(biāo)記胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EDRF1/C10orf137 紅細(xì)胞分化相關(guān)因子1抗體 規(guī)格 0.2ml
CX3CR1(Human CX3C-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CX3C趨化因子受體1 96T
phospho-MYF5 (phospho Ser49) 英文名稱: 磷酸化生肌決定因子Myf5抗體 0.1ml
轉(zhuǎn)基因品系玉米NK603XMON863 PCR試劑盒植物甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法活性熒光定量檢測試劑盒LY6K ELISA KitC34H42O20
植物甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性定量檢測試劑盒Mouse IL-12(P40)ELISA KITC30H48O4
植物堿性焦磷酸酶(Alkaline Pyrophosphatase)活性比色法法定量檢測試劑盒Human C4a ELISA KitC57H104O6
植物結(jié)構(gòu)域重排甲基轉(zhuǎn)移酶(Domain Rearranged Methylase;DRM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒Human anti-cardiolipin antibody IgG,ACA-IgG ELISA KitC14H12O4
植物聚甲基半乳糖醛酸酶(Polymethylgalacturonase;PMG)活性比色法定量檢測試劑盒Human EG-VEGF ELISA KitC6H13NO5
植物賴氨酸羥化酶(lysyl hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒MVK(Mevalonate kinase) ELISA KitC9H11NO4
植物亮氨酸氨基肽酶(leucine aminopeptidase;LAP)電泳分析試劑盒MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA KitC17H26O10
植物磷酸葡萄糖酸脫氫酶(phosphogluconate dehydrogenase;PGD)電泳分析試劑盒Anti-LAMP2(Anti-lysosomal Associated Membrane Protein 2 Antibody) ELISA KitC44H64O24