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IHC是指免疫組織化學(xué),是許多實驗室里都會運用到的主要免疫測定方法,用來證明重要蛋白質(zhì)是否存在,檢測翻譯后修飾,診斷疾病等等。IHC利用免疫學(xué)和生化技術(shù)并通過與目標(biāo)抗原相互作用的標(biāo)記抗體來檢查不同的組織切片??贵w抗原相互作用的可視化可以使用可見標(biāo)記或者染色劑體現(xiàn)出來。IHC具有可視化細胞的獨te細胞成分的作用,廣泛被病理學(xué)家和診斷人員使用。我們在進行IHC實驗前一般都要制備樣品,那么怎樣制備IHC樣品呢?
樣品制備如下:
1.在室溫環(huán)境下用2%多聚甲醛將新鮮解剖的組織(<3mm厚) 1小時或過夜固定。
2.沖洗組織:使用流動的自來水沖洗5min。
3.用70%,80%,95%的酒精分別使組織脫水,時間每次為5分鐘,然后用100%的酒精進行3次脫水,每次時間為5分鐘。
4.用二甲苯清洗組織2次,每次時間為5分鐘。
5.將組織浸泡在石蠟中3次,每次時間為5分鐘。
6.將組織包埋在石蠟塊中(可以在室溫下保存多年)。
7.在切片機上將石蠟包埋的組織塊切成5-8μm的厚度并漂浮在含有蒸餾水的40°C水浴中。
8.將切片轉(zhuǎn)移到適合免疫組織化學(xué)的載玻片上。
9.切片后在65℃的溫度下烘干6小時。
以上就是關(guān)于怎樣制備IHC樣品的全部內(nèi)容,想要了解更多請聯(lián)系百奧創(chuàng)新客服為您解答~
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