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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-08-09 15:34:27瀏覽次數(shù):419次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運(yùn)輸
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基圖片
小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基運(yùn)輸
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基圖片
英文名稱:Rat retinal ganglion cells in complete culture medium
規(guī)格:100mL
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0528
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基圖片的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基圖片收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
含量: 121034-200302 規(guī)格: 20mg/支
滿山紅(興安杜鵑) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121035-200204 規(guī)格: 20mg/支
漏蘆(祁州漏蘆) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121036-200302 規(guī)格: 20mg/支
獐牙菜 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121037- 規(guī)格: 20mg/支
槲寄生 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121038-200403 規(guī)格: 20mg/支
丁香 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121039-200503 規(guī)格: 20mg/支
大棗 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121040-201006 規(guī)格: 20mg/支
女貞子 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121041-200703 規(guī)格: 20mg/支
甘遂 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121042-200603 規(guī)格: 20mg/支
石榴皮 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121043-200403 規(guī)格: 20mg/支
全蝎 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121044-200202 規(guī)格: 20mg/支
紅參 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121045-200604 規(guī)格: 20mg/支
魚腥草 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121046-200904 規(guī)格: 20mg/支
金櫻子 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121047-200302 規(guī)格: 20mg/支
* 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121048-200504 規(guī)格: 20mg/支
茜草 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121049-201003 規(guī)格: 20mg/支
桂皮 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121050- 規(guī)格: 20mg/支
麻黃(草麻黃) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121051-200704 規(guī)格: 20mg/支
紫草茸 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121052-200302 規(guī)格: 20mg/支
鵝不食草 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121053-0301 規(guī)格: 20mg/支
當(dāng)歸尾 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121054-200505 規(guī)格: 20mg/支
南山楂 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121055-200302 規(guī)格: 20mg/支
補(bǔ)骨脂 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121056-200503 規(guī)格: 20mg/支
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基圖片黨參 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121057-200805 規(guī)格: 20mg/支
■洋金花 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121058-200503 規(guī)格: 20mg/支
香附 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121059-200706 規(guī)格: 20mg/支
金銀花 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121060-200906 規(guī)格: 20mg/支
水蛭(螞蟥) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 TLC法鑒別 含量: 121061-200503 規(guī)格: 20mg/支
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