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更新時間:2017-09-13 09:44:29瀏覽次數(shù):136次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)小鼠雜交瘤細胞;HB Hepama-1培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態(tài)良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨期 |
半貼壁生長 | 3-5天 |
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;HB Hepama-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
小鼠雜交瘤細胞;HB Hepama-1培養(yǎng)復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
小鼠雜交瘤細胞;HB Hepama-1培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
印度苦楝樹Azadirachta indica Nimbin 印楝素 5945-86-8 C30H36O9 ≥98%
植醋Phyticccid83-86-320mg
飛龍掌血Toddalia asiatica 5,7,8-Trimetxoxycoumarin 5,7,8-*氧基 60796-65-8 C12H12O5 單元素镥溶液成分分析標準物質(zhì)080575
含量測定林旦100324-200001常溫,避光50mg
非諾多泮相關(guān)物質(zhì)A標準品20mg
盆架樹Winchia calophylla N-Demetxylechitamine N-去甲基雞骨常山堿 60048-88-6 C21H26N2O4 ≤80%
紫蘇烯Basilene239-2-620mg
北美鵝掌楸Liriodendron tulipifera 2,2,5,5-Tetrametxylcyclohexane-1,4-dione 2,2,5,5-四甲基環(huán)己烷-1,4-二同 86838-54-2 C10H16O2 膽酸(100078
中藥對照藥材毛訶子121206-0101TLC法鑒別
Dexy7nocorydalin脫氫紫堇堿純度:≥98%
18559-94-9 *標準品 200mg
野馬追內(nèi)酯BEupatoriumlindleyanumlactonepHPLC≥98%;20mg/支
O-Demetxylforbexanthone 7,9,12-三輕基-2,2-二甲基-2H,6H-并[3,2-B]氧雜意-6-同 92609-77-3
烯蟲酯 標準品 號:40596-69-8 100mg
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PALCAM瓊脂平板(9cm) 10個/包
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SS瓊脂顆粒 300ml/袋*10 用于沙門氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
堿性蛋白胨水顆粒 225ml/袋*10 用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標準)
3%堿性蛋白胨水顆粒 225ml/袋*10 用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)
小鼠雜交瘤細胞;HB Hepama-1培養(yǎng)GlycineMedium
水稻水培養(yǎng)液 250g 用于水稻的水培養(yǎng)液
吖啶黃素 3.75mg/支*5 每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標準)
2改良牛津培養(yǎng)基盒每支用于中incubationmedia2改良牛津培養(yǎng)基盒每支用于中
MEM維持液 36支/盒 用于病毒的運送
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