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更新時間:2017-09-06 13:20:54瀏覽次數(shù):430次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906品牌
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906品牌培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細(xì)胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0200RWPE1(人前列腺上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞cDNAHOPC cDNA
MCF-7細(xì)胞,人癌細(xì)胞 人肺鱗癌細(xì)胞,LTEP-s細(xì)胞 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild
PLAT Others Human 人 tPAβ 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 Mouse
CM-H015人支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106)
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7712 小鼠腎實質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
*;HEL
TREM1 Others Human 人 TREM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0200RWPE1(人前列腺上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞cDNAHOPC cDNA
MCF-7細(xì)胞,人癌細(xì)胞 人肺鱗癌細(xì)胞,LTEP-s細(xì)胞 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild
PLAT Others Human 人 tPAβ 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Anti-phospho APP(pThr668)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗大鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體 Anti-FLIP S/L 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
FNIP2 英文名稱: 卵泡刺激素結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-STAT5a(Tyr694) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗大鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1) 離子鈣接頭蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CFL1/CFL2 (Tyr88) 磷酸化絲切蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗小鼠IgG血清 0.5ml 國產(chǎn)
WISP1 英文名稱: Wnt1信號通路蛋白1抗體 0.1ml
DAPK2 英文名稱: 凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體 0.1ml
Anti-ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906品牌SARS putative orflab polyprotein 英文名稱: 冠狀病毒抗體 0.2ml
phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr968) 英文名稱: 磷酸化酪酸蛋白激酶受體B1抗體 0.1ml
黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗體 Anti-CD146/MCAM 0.1ml
Anti-V.cholera Ogawa/Biotin *化01群小川型霍亂弧菌抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化組蛋白去乙?;?/span>4/5/7抗體 規(guī)格 0.1ml
GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2) 醋酸促生長激素釋放肽2Multi-class antibodies規(guī)格: 1g
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