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更新時間:2017-09-06 12:43:54瀏覽次數(shù):142次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞名稱 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293品牌
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 我們*使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細(xì)胞株,但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK293細(xì)胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。 跟HEK293細(xì)胞一樣,AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因,當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒,pAAV-RC, 和E1缺失助質(zhì)粒)時,可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:7,11,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293品牌培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實(shí)驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
RSV-F Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0128JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人肺動脈平滑肌細(xì)胞裂解物HPASMCL
PC-3細(xì)胞,人前列腺癌細(xì)胞 人腎癌細(xì)胞,Ketr-3細(xì)胞 臍帶單核細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔主動脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-2
TFPI Others Mouse 小鼠 TFPI / LACI / EPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse
CM-M027小鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人結(jié)膜纖維原細(xì)胞(HConF)(5×105 )
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS 小鼠上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615
WFIKKN2 Others Human 人 WFIKKN2 / GASP-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0128JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RSV-F Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人肺動脈平滑肌細(xì)胞裂解物HPASMCL
PC-3細(xì)胞,人前列腺癌細(xì)胞 人腎癌細(xì)胞,Ketr-3細(xì)胞 臍帶單核細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔主動脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-2
TFPI Others Mouse 小鼠 TFPI / LACI / EPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
GSR/GRase(glutathione reductase) *還原酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (FITC) Mouse
Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格 0.1ml
紅細(xì)胞裂解液(10X) 10ml
ZBT24 英文名稱: 鋅指蛋白450抗體 0.2ml
Phospho-Dab1 (Tyr198) 英文名稱: 磷酸化磷脂蛋白受體Dab1抗體 0.1ml
SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (FITC) Mouse
KT3 tag KT3 tag標(biāo)簽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) 磷酸化5-脂氧合酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CK18(Ser33) 磷酸化細(xì)胞角蛋白18抗體 規(guī)格 0.1ml
羊抗人C3 0.5ml 國產(chǎn)
XPC 英文名稱: DNA補(bǔ)充修復(fù)XPC細(xì)胞蛋白抗體 0.1ml
DR5 英文名稱: 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗體 0.1ml
Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) 磷酸化5-脂氧合酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293品牌SOX4 英文名稱: 核轉(zhuǎn)錄因子SOX4抗體 0.2ml
ERp72 英文名稱: 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體 0.2ml
細(xì)胞毒性受體NK-p46抗體 Anti-CD335/NKp46/NCR1 0.1ml
Anti-Vimentin/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記波形蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GABRG2(Ser327) 磷酸化γ氨基丁酸γ2受體抗體 規(guī)格 0.1ml
ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰*受體M1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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