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更新時間:2017-07-17 14:15:00瀏覽次數(shù):137次
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單細胞裂解液 (RNA)1mL價格詳細說明書:
單細胞裂解液 (RNA)1mL價格產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
單細胞裂解液 (RNA)1mL價格變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
單細胞裂解液 (RNA)1mL價格DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
單細胞裂解液 (RNA)1mL價格使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
11β-Prostaglandin F1β (5 mg) 9。beta。,11。beta。,15S-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 9β,11β-PGF1α|11β-PGF1β|11-epi PGF1β; 11β-Prostaglandin F1β
25B-NBF (hydrochloride) (1 mg) 2;C-B-NBF; 4-bromo-N-[(2-fluorophenyl)methyl]-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride
Gamborg’s維生素混合物粉末(1LT) Gamborg’s Vitamin Mixture (Powder), Each liter of powder makes one liter of a 1000X vitamin stock solution
Adenosine 5’-(γ-thio)-triphosphate (litxium salt) (10 mg) P’-anhydride with phosphorothioic acid adenosine 5’-(trihydrogen diphosphate), tetralitxium salt; ATPγS; Adenosine 5’-(γ-thio)-triphosphate (litxium salt)
Carnosol (1 mg) 1,3,4,9,10,10aS-hexahydro-5,6-dihydroxy-1,1-dimethyl-7-isopropyl-2H-9S,4aR-(epoxymethano)-12-one; Carnosol
(S)-4-ethyl-4-hydroxy-1H-pyrano[3’,4’:6,7]indolizi,2-b]quinoline-3,14-(4H,12H)-dione Camptothecin
PA Assay DMSO (1 ml) PA Assay DMSO
丙戊酸 Valproic Acid (0。5 g)
4-Methylbenzamide oxime (500 mg) N-hydroxy-4-methyl-benzenecarboximidamide; p-Toylamideoxime; 4-Methylbenzamide oxime
CAY10678 (10 mg) N-
G-36 (1 mg) (4S)-rel-4-(6-bromo-1,3-benzodioxol-5-yl)-3aR,4,5,9bS-tetrahydro-8-(1-methylethyl)-3H-cyclopenta[c]; G-36
Microcystin-LR (1 mg) Cyanoginosin-LR, Microcystin-LR, Toxin T 17 (Microcystis aeruginosa)
Phosphate Buffer (250 dtn) Phosphate Buffer
1-thio-β-D-Glucose (wo7ium salt) (500 mg) Click Tag
5-FAM炔烴 5-FAM Alkyne
BRD4770 (1 mg) HMTase Inhibitor VI; 2-(benzoylamino)-1-(3-pxenylpropyl)-1H-benzimidazole-5-carboxylic acid, metxyl ester
Docosatetraenoyl Ethanolamide (5 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-7Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenamide; DEA; Docosatetraenoyl Ethanolamide
N-Isobutyl-N-(4-metxoxypxenylsulfonyl)glycyl xy7noxamic acid MMP-III Inhibitor, NNGH
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