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更新時(shí)間:2017-07-17 14:11:42瀏覽次數(shù):185次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)高 GC 革氏陽(yáng)性細(xì)菌 PCR Mix 5100 次圖片
古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門(mén)為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
8-iso Prostaglandin F1β (50 mg) 9。beta。,11。alpha。,15S-trihydroxy-(8。beta。)-prost-13E-en-1-oic acid; 8-epi-9β-PGF1α|8-iso PGF1β; 8-iso Prostaglandin F1β
3-CAF (1 mg) naphthalen-2-yl 1-(2-fluorophenyl)-1H-indazole-3-carboxylate
杜氏磷酸緩沖液(500ML) Dulbecco’s PBS, Without calcium and magnesium. Sterile filtered.
HA-100 (hydrochloride) (5 mg) 5-(1-piperazinylsulfonyl)-isoquinoline, dihydrochloride; C-1; HA-100 (hydrochloride)
Trichostatin A (1 mg) 7-[4-(dimethylamino)phenyl]-N-hydroxy-4,6R-dimethyl-7-oxo-2E,4E-heptadienamide; TSA; Trichostatin A
Q-IE(OMe)-TD(OMe)-OPh; Quinolyl-Ile-Glu(OMe)-Thr-Asp(OMe)-OPh Caspase-8 Inhibitor, Q-IETD-OPh
HDAC8 Developer (1 ea) HDAC8 Developer
二甲基化組蛋白H3K4多肽 Dimethyl Histone H3K4 Peptide (200 ul)
thio-p-Toluamide (1 g) 4-methyl-benzenecarbothioamide; 4-thioamide; thio-p-Toluamide
1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-O-ethyl-3-PC (chloride) (100 mg) 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-O-ethyl-3-Phosphocholine|1,2-EDPPC|DPePC; 4-ethoxy-N,N,N-trimethyl-10-oxo-7R-[(1-oxohexadecyl)oxy]-4-oxide-3,5,9-trioxa-4-phosphapentacosan-1-aminium, monochloride
PB-22 N-(4-hydroxypentyl) metabolite (5 mg) quinolin-8-yl 1-(4-hydroxypentyl)-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 N-(4-hydroxypentyl) metabolite
CAY10493 (5 g) 4-[1-(4-tert-Butoxycarbonyl-benzyl)-1H-indol-4-yl]-Piperezine-1-carboxylic acid tert-butyl ester, CAY10493, 4-[1-(4-tert-butoxycarbonyl-benzyl)-1H-indol-4-yl]-piperezine-1-carboxylic acid tert-butyl ester
enponete Buffer (1 ea) wo7ium enponete; enponete Buffer
Nε- CML; N6-(carboxymetxyl)-L-lysine
藍(lán)色活細(xì)胞熒光探針Cytol Blue Cytol Blue
10-nitnooleate-d17 (500 ug) 10-nitnooleic Acid-d17|10-nitno-9-trans-Octadecenoic Acid-d17; 10-nitno-9E-octadecenoic-11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,18-d17 acid
13-Docosenamide (5 g) 13Z-docosenamide; Armoslip E|Erucamide|cis-13-Docosenamide; 13-Docosenamide
2-(4-Benzylpxenoxy)-N-(1-benzylpiperidin-4-yl)acetamide AdipoRon
NitrateSalinePeptoneWaterMedium
維生素B12測(cè)定用培養(yǎng)基 100(g) incubation media 維生素B12測(cè)定用培養(yǎng)基 100(g)
胰蛋白胨水肉湯 Tryptone Broth 250克 靛基質(zhì)試驗(yàn)
產(chǎn)毒培養(yǎng)基250用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)incubationmedia產(chǎn)毒培養(yǎng)基250用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)
H-頂層培養(yǎng)基 250g 用于鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames試驗(yàn))
改良MSRV培養(yǎng)基(定量)250g用于沙門(mén)氏菌的分離培養(yǎng)
氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g 用于氣單胞菌分離培養(yǎng)
XLT4瓊脂 XLT4 Agar 250 用于食品中致病菌,特別是沙門(mén)氏菌分離培養(yǎng)(Merck方法)
小牛浸液肉湯250g/瓶用于苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)incubationmedia小牛浸液肉湯250g/瓶用于苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)
RoseBengalMedium
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片弗拉特氏菌培養(yǎng)基250g用于弗拉特氏菌平板計(jì)數(shù)
5L incubation media 5L
類球紅細(xì)菌(球形紅桿菌) 支/瓶
EC肉湯(含小倒管)20支/包用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定
MannitolSaltAgarMedium
GTP 溶液,2.5mM2mL圖片變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合
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