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古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
UTP 溶液,100mM0.25mL運(yùn)輸詳細(xì)說明書:
UTP 溶液,100mM0.25mL運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
UTP 溶液,100mM0.25mL運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
UTP 溶液,100mM0.25mL運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
UTP 溶液,100mM0.25mL運(yùn)輸使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
8-iso Prostaglandin F1β (1 mg) 9。beta。,11。alpha。,15S-trihydroxy-(8。beta。)-prost-13E-en-1-oic acid; 8-epi-9β-PGF1α|8-iso PGF1β; 8-iso Prostaglandin F1β
2-Methylami-phenylbutane (hydrochloride) (25 mg) α-ethyl-N-methyl-Benzeneethanamine; α-ethyl-N-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride
七水流鋅(500GM) Zinc Sulfate, 7H2O, 7446-20-0; ≥99%
3C-P (hydrochloride) (50 mg) 1-(3,5-dimethoxy-4-propoxyphenyl)propan-2-amine, monohydrochloride; 3,5-methoxy-4-Propoxyamphetamine; 3C-P (hydrochloride)
γ-CEHC (25 mg) 3,4-dihydro-6-hydroxy-2,7,8-trimethyl-2H-1-benzopyran-2-propanoic acid; 2,7,8-trimethyl-2-(β-Carboxy-Ethyl)-6-Hydroxychroman|GTM|γ-Tocopherol Metabolite; γ-CEHC
3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-4H-chromen-4-one; 3’-Hydroxydiadzein; THIF; 7,3’,4’-THIF 7,3’,4’-Trihydroxyisoflavone
HDAC8 (human recombinant) Assay Reagent (1 ea) HDAC8 (human recombinant); HDAC8 (human recombinant) Assay Reagent
*標(biāo)記單甲基化組蛋白H3K4多肽 Biotinylated Monomethyl Histone H3K4 Peptide (100 ul)
Fumonisin B2 (500 ug) 1,1’-[(1S,2R)-1-[(2S,9R,11S,12S)-12-amino-9,11-dihydroxy-2-methyltridecyl]-2-[(1R)-1-methylpentyl]-1,2-ethanediyl]ester-1,2,3-propanetricarboxylic acid; Fumonisin B2
CCG-203971 (5 mg) N-(4-chlorophenyl)-1-[3-(2-furanyl)benzoyl]-3-pipeni7inecarboxamide
PB-22 3-carboxyindole metabolite (5 mg) 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylic acid; PB-22 3-carboxyindole metabolite
1-Palmitoyl-2-linoleoyl PE (100 mg) PLPE|Phosphatidyl Ethanolamine (1-palmitoyl, 2-linoleoyl), 1-Palmitoyl-2-linoleoyl PE, (1R)-1-[[[(2-aminoethoxy)hydroxyphosphinyl]oxy]methyl]-2-[(1-oxohexadecyl)oxy]ethyl ester, 9Z,12Z-octadecadienoic acid
Foil Plate Covers (1 ea) Foil Plate Covers
Epothilone A (5 mg) Epo A; (1S,16R)-7S,11S-dixy7noxy-8,8,10R,12S-tetrametxyl-3S-[(1E)-1-metxyl-2-(2-metxyl-4-thiazolyl)ethenyl]-4,17-dioxabicyclo[14.1.0]heptadecane-5,9-dione
pH熒光探針Protonex Green 500, 右旋糖苷 Protonex Green 500 Dextran
Icilin (100 mg) AG 3-5; 3,6-dixy7-(2-xy7noxypxenyl)-4-(3-nitnopxenyl)-2(1H)-pyrimidinone
13-Docosenamide (100 mg) 13Z-docosenamide; Armoslip E|Erucamide|cis-13-Docosenamide; 13-Docosenamide
4-(4-Benzofurazanyl)-1,4-dixy7no-2,6-dimetxyl-3,5-pyridinedicarboxylic acid, metxyl, 1-metxylester diester Isradipine
賴酸鐵瓊脂(LIA)250g用于食品中沙門氏菌生化試驗(yàn)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
*瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于紡織品微真菌影響評價(jià)試驗(yàn)
煌綠乳糖膽鹽肉湯 (BGLB) Brilliant Green Lactose Bile Broth 250 用于大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標(biāo)準(zhǔn))
霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基l/瓶incubationmedia霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基l/瓶
ContactPlateMedium
SabouraudBHIAgar
L型細(xì)菌高滲糖* 250(g) incubation media L型細(xì)菌高滲糖* 250(g)
皰肉牛肉粒 Dried Meat Particle 100克 加入苞肉基礎(chǔ)中配成苞肉培養(yǎng)基
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌incubationmedia小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌
PAC斜面培養(yǎng)基 250g 用于弧菌的保存
UTP 溶液,100mM0.25mL運(yùn)輸BGdium
5L incubation media 5L
蠟狀芽孢桿菌 模式菌株 支/瓶
ModifiedECEnrichmentBroth
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選(葡萄糖,乳糖,蔗糖)
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