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3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD

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3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸詳細(xì)說明書:

3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時(shí)間退火沒有必要。
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
8-iso Prostaglandin F1α 1 mg     9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-8。beta。)-prost-13E-en-1-oic acid; 8-epi PGF1α; 8-iso Prostaglandin F1α

R-Prunasin 1 mg     (αR-

超濾酵母提取物(2.5KG     Yeast Extract, Ultra Filtered 8013-01-4

Digitonin 250 mg     2α,3β,5α,15β,25R-2,15-dihydroxyspirostan-3-yl O-β-D-glucopyranosyl-13-O-β-D-galactopyranosyl-12-O-[β-D-xylopyranosyl-14-β-D-galactopyranoside; Digitin|NSC 23471|NSC 237417; Digitonin

nitnotyrosine 5 g     3-nitno-L-tyrosine; nitnotyrosine

8,8-[Carbonylbis[imino-3,1-phenylenecarbonylimino4-methyl-31-phenylenecarbonylimino]]bis-1,35-nepxtxelenetrisulfonic acid hexasodium salt     Sunemin Hexasodium Salt
SMase Fluorometric Substrate 1 ea     SMase Fluorometric Substrate

乙?;M蛋白H4K16多肽     Acetyl Histone H4K16 Peptide 100 ul

trans-Zeatin 50 mg     2E-methyl-4-9H-purin-6-ylamino-2-buten-1-ol; trans-Zeatin

HPOB 10 mg     4-[hydroxyaminocarbonyl]-N-2-hydroxyethyl-N-phenyl-benzeneacetamide

5-fluoro PB-22 3-carboxyindole metabolite 10 mg     1-5-fluoropentyl-1H-indole-3-carboxylic acid; 5-fluoro PB-22 3-carboxyindole metabolite

Oleic Acid-2,6-diisopropylanilide (100 mg)     Oleic Acid-2,6-diisopropylanilide, N-[2,6-bis(1-methylethyl)phenyl]-9Z-octadecenamide
SPE Cartridges C-18 6 ml 5 ea     C-18 Column|Solid Phase Extraction Cartridges SPE Cartridges C-18 6 ml

1,3-Dilinoleoyl-rac-glycerol 50 mg     1,3-Dilinolein|1,3-Glyceryl dilinoleate; 1,1-2-xy7noxy-1,3-propanediyl ester-9Z,12Z-octadecadienoic acid

RatioWorks PDMPO, 琥珀酰亞胺酯     RatioWorks PDMPO SE

Rosiglitazone meleete 1 g     Avandia|BRL 49653C; 5-[[4-[2-metxyl-2-pyridinylaminoethoxy]pxenyl]metxyl]-2,4-thiazolidinedione, 2Z-2-butenedioate 1:1

Oleamide 1 g     9Z-octadecenamide; cis-9-Octadecenamide Oleamide

1-4-metxoxypxenyl-2-metxyl-3-nitH-indol-6-ol     ID-8
改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯(MLST)2220g用于奶粉中阪崎腸桿菌的檢驗(yàn)的增菌和分子生物學(xué)檢驗(yàn)方法(PCR)選擇性增菌(GB4789.40-201...

彎曲菌瓊脂基礎(chǔ) (CM0689) Oxoid incubation media 彎曲菌瓊脂基礎(chǔ) (CM0689) Oxoid

脫氮假單胞菌 殺鱗翅目昆蟲 /

Voges-Proskauer(V-P)試劑5ml*4用于V-P試驗(yàn)

BacterialL-growingAgar
3%堿性蛋白胨水250g用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)

假單胞菌cfc選擇性培養(yǎng)基添加劑 1ml*5 每支加入200ml假單胞菌cfc選擇性培養(yǎng)基中。

BPL瓊脂 BPL Agar 250 用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法)

現(xiàn)隱肉湯PA250g/瓶用于水中大腸菌群計(jì)數(shù)incubationmedia現(xiàn)隱肉湯PA250g/瓶用于水中大腸菌群計(jì)數(shù)

XLD培養(yǎng)基平板(9cm) 10個(gè)/ 選擇性培養(yǎng)基,主要用于分離志賀氏菌屬,亦可用于分離沙門氏菌
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD運(yùn)輸西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基2200g用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)

6511-prf CEpiCM-prf 角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 6511-prf CEpiCM-prf 角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

月桂基鹽胰蛋白胨肉湯(LST) 300ml/*10 用于大腸菌群,大腸桿菌的測(cè)定(GBSN標(biāo)準(zhǔn))

DNaseAgar

BM固體培養(yǎng)基 250g 用于醋酸鈣不動(dòng)桿菌增菌培養(yǎng)

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