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更新時間:2017-07-17 13:27:11瀏覽次數:179次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次保存使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數的 PCR(循環(huán)數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次保存產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次保存詳細說明書:
tetranor-PGEM (100 ug) 9,15-dioxo-11α-hydroxy-13,14-dihydro-2,3,4,5-tetranor-prostan-1,20-dioic acid; tetranor-Prostaglandin E Metabolite; tetranor-PGEM
Prednisolone Phosphate (sodium salt) (25 g) Disodium Prednisolone 21-Phosphate; 11β,17-dihydroxy-21-(phosphonooxy)-pregna-1,4-diene-3,20-dione, disodium salt
一水*(2.5KG) Sodium Phosphate, Monobasic, Monohydrate, USP Grade; 10049-21-5; Formula:NaH2PO4
NBQX (sodium salt) (10 mg) 1,2,3,4-tetrahydro-6-nitno-2,3-dioxo-benzo[f]inoneoxaline-7-sulfonamide, disodium salt; NBQX (sodium salt)
DAF-2 (1 mg) 2-(3,6-dihydroxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; 4,5-Diaminofluorescein; DAF-2
Phosphate Buffered Saline-Twen Tablets PBS-Tween Tablets
potewwium Phosphate Buffer (1 M; pH 7。2; 10 mM MgCl2) (5 ml) potewwium Phosphate Buffer; potewwium Phosphate Buffer (1 M; pH 7。2; 10 mM MgCl2)
SRT 1720 (5 mg) CAY10559|SIRT 1933; N-[2-[3-(1-piperazinylmethyl)imidazo[2,1-b]thiazol-6-yl]phenyl]-2-quinoxalinecarboxamide
Halopemide (1 mg) N-[2-[4-(5-chloro-2,3-dihydro-2-oxo-1H-benzimidazol-1-yl)-1-piperidinyl]-ethyl]-4-fluoro-benzamide; NSC 354856|R34301; Halopemide
Neutrophil Elastase Inhibitor (5 mg) 1-(3-methylbenzoyl)-1H-indazole-3-carbonitnile
AM694 N-pentanoic acid metabolite (5 mg) 5-(3-(2-iodobenzoyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid; AM694 N-pentanoic acid metabolite
DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 3.5 kDa DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 3.5 kDa
Arachidonoyl Ethanolamide-d8 (5 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide-5,6,8,9,11,12,14,15-d8; AEA-d8|Anandamide-d8; Arachidonoyl Ethanolamide-d8
AB-CHMINACA metabolite M6 (1 mg) 4-amino-3-(1-(cyclohexylmetxyl)-1H-indazole-3-carboxamido)-2-metxyl-4-oxobutanoic acid
iFluor 488 酰進 iFluor 488 hydrazide
2-Ami-pxenylbutane (xy7nochloride) (5 mg) α-etxyl-benzeneethanamine, monoxy7nochloride; AEPEA|Butanpxenamine|α-etxylpxenetxylamine; 2-Ami-pxenylbutane (xy7nochloride)
Adrenic Acid (10 mg) 7Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenoic acid; Adrenic Acid
1- Isoliquiritigenin
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基2405g可廣泛應用于細菌的培養(yǎng),特別用于消毒劑消毒效果的測試、*的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟...
十六烷*基*瓊脂 (CM0579) Oxoid incubation media 十六烷*基*瓊脂 (CM0579) Oxoid
桃色歐文氏菌 支/瓶
EEMmedium
BloodAgarBase
肉湯培養(yǎng)基I250g用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。
Antibiotic agar GROVE and RANDALL medium 抗生素瓊脂1號 1.05272.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic agar GROVE and RANDALL medium 抗生素瓊脂1號 1.05272.0500 MERCK默克
Fraser肉湯增菌液(FB1,FB2)基礎 250g 用于李斯特氏的選擇性增菌培養(yǎng)(SN/T0184.1-2
免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次保存瓊脂培養(yǎng)基K250g用于沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)
Antibiotic agar 2 GROVE and RANDALL medium 2 抗生素瓊脂12號 1.10672.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic agar 2 GROVE and RANDALL medium 2 抗生素瓊脂12號 1.10672.0500 MERCK默克
李氏增菌肉湯基礎(LB1,LB2) 250g 用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB 4789.3
免 DNA 提取 PCR 試劑盒100 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合
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