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雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片

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雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片詳細(xì)說(shuō)明書:

雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95。 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2 5 mg     9-oxo-11a15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,1819,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid 16-phenoxy tetranor PGE2 16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2

5-Cyano-2,3-di-p-tolyltetrazolium chloride 10 mg     CTC|Cyanotolyl Tetrazolium Chloride; 5-cyano-2,3-bis4-methylphenyl-2H-tetrazolium, monochloride

二水鉬酸鈉(1KG     Sodium MolybdateVI), Dihydrate, 10102-40-6; MW 241.95; ACS

Meloxicam 50 mg     4-hydroxy-2-methyl-N-5-methyl-2-thiazolyl-1,1-dioxide-2H-1,2-benzothi-3-carboxamide; Coxicam|UH-AC 62XX; Meloxicam

DAN-1 EE hydrochloride 10 mg     4-[[3-amino-2-naphthalenylamino]methyl]-benzoic acid, ethyl ester monohydrochloride; DAN-1 EE hydrochloride

4-1,1,3,3-Tetramethylbutylphenyl-polyethylene glycol t-Octylphenoxypolyethoxyethanol, Polyethylene glycol tert-octylphenyl etxen     Triton X-100, MegaPure Detergent 10% Solution
Xestospongin C 1 mg     [1R-1R,4aR,11R,12aS,13S16aS,23R,24aS]-eicosahydro-5H17H-1,23:1113-diethano-2H,14H-[111]dioxacycloeicosino[2,3-b:12,13-b1]dipyridine; XeC|Araguspongine E Xestospongin C

SureLight Allophycocyanin APC 1 mg     SureLight Allophycocyanin APC

DAPT 50 mg     N-[2S-3,5-difluorophenylacetyl]-L-alanyl-2-phenyl-1,1-dimethylethyl ester-glycine GSI-IX; DAPT

W-15 10 mg     4-chloro-N-[1-2-phenylethyl-2-piperidinylidene]-benzenesulfonamide

JWH 081 N-4-hydroxypentyl metabolite 10 mg     1-4-hydroxypentyl-1H-indol-3-yl)(4-methoxynaphthalen-1-ylmethanone JWH 081 N-4-hydroxypentyl metabolite

DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 6-8 kDa     DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 6-8 kDa
ω-3 Arachidonic Acid-d8 500 ug     8Z,11Z14Z,17Z-eicosatetraenoic-8,9,11,12,14,1517,18-d8 acid ω-3 AA-d8; ω-3 Arachidonic Acid-d8

4-Chlorometxcathinone xy7nochloride 10 mg     4-CMC|Clephedrone 1-

鬼筆環(huán)肽-iFluor 700偶聯(lián)物     Phalloidin-iFluor 700 Conjugate

phospho-Linoleoyl Ethanolamide 500 ug     N-[2-phosphonooxyetxyl]-9Z,12Z-octadecadienamide diwo7ium salt; phospho-LEA; phospho-Linoleoyl Ethanolamide

Oleoyl Ethanolamide 5 mg     N-2-xy7noxyetxyl-9Z-octadecenamide; OEA|Oleic Acid Ethanolamide; Oleoyl Ethanolamide

3R,5aS6R,8aS,9R12S,12aR-Octaxy7no-3,6,9-trimetxyl-3,12-epoxy-12H-pyrano[43-j]-12-benzodioxepin-103H-one     Artemisinin
AgarmediumC

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基A 1000 mL/ incubation media 沙門氏菌顯色培養(yǎng)基A 1000 mL/

牛津瓊脂基礎(chǔ) 100g 用于單核增生李斯特氏菌的選擇性分離(SN0184-2005)。

瓊脂培養(yǎng)基SAgarmediumS(R2A)用于飲用水中細(xì)菌總數(shù)的計(jì)數(shù)。

BBLAgarMedium
梭菌屬測(cè)定用培養(yǎng)基250g用于梭菌屬細(xì)菌檢測(cè)

甲苯胺藍(lán)-DNA酶瓊脂 Toluidine Blue DNAse Agar 用于核糖核酸酶檢測(cè)

C.L.E.D 培養(yǎng)基 C.L.E.D Medium 250 用于尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)(OXOID方法)

梭菌*250g/瓶用于梭菌的增菌培養(yǎng)incubationmedia梭菌*250g/瓶用于梭菌的增菌培養(yǎng)

SimmonsCitrateAgar
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4圖片BufferedListeriaEnrichmentBrothSupplement

B5培養(yǎng)基 B5 Medium 用于植物組織培養(yǎng)

LIA瓊脂 Lysine Iron Agar 250 食品中沙門氏菌生化試驗(yàn)

選擇性APS肉湯基礎(chǔ)250g/瓶非動(dòng)物源配方,用于分子生物學(xué)試驗(yàn)中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)incubationmedia選擇性APS肉湯基礎(chǔ)250g/瓶非動(dòng)物源配方,用于分子生物學(xué)試驗(yàn)中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)

EnterococcusAgar

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