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dNTP 溶液,2.5mM5mL運輸

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更新時間:2017-07-17 13:06:37瀏覽次數(shù):229次

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dNTP 溶液,2.5mM5mL運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

dNTP 溶液,2.5mM5mL運輸詳細(xì)說明書:

dNTP 溶液,2.5mM5mL運輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
dNTP 溶液,2.5mM5mL運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
dNTP 溶液,2.5mM5mL運輸DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測,一般實驗中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
dNTP 溶液,2.5mM5mL運輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15R-15-methyl Prostaglandin E2 1 mg     9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Arbaprostil|15R-15-methyl PGE2 15R-15-methyl Prostaglandin E2

cis-tneme7ol hydrochloride 50 mg     CG 315|Contramal|NIH 10969|Tramal|Ultram|Zydol;

維生素B6(鹽酸吡哆醇)(100GM     Pyridoxine HCl 58-56-0; 98%

4Z),7Z-Decadienoic Acid-d5 500 ug     4Z,7Z-deca-47-dienoic-9,9’,10,10,10-d5 acid 4Z),7Z-Decadienoic Acid-d5

SNAP 25 mg     N-acetyloxy-3-nitnosothiovaline; S-nitnoso-N-Acetyl-D,L-Penicillamine; SNAP

2-Methyl-4-(((4-methyl-2-4-trifluoromethylphenyl-1,3-thiazol-5-ylmethylsulfanylphenoxyacetic acid     GW501516
PtdIns-3-P1 12-dipalmitoyl ammonium salt 500 ug     1-1,2-dihexadecanoylphosphatidylinositol-3-phosphate diammonium salt; DPPI-3-P1; PtdIns-3-P1 1,2-dipalmitoyl ammonium salt

1-methyl-D-Tryptophan 1 g     1-methyl-D-tryptophan

17S-HpDoHE 100 ug     17S-hydroperoxy-4E,7Z10Z,13Z,15Z19Z-docosahexaenoic acid; 17S-hydroperoxy Docosahexaenoic Acid; 17S-HpDoHE

3-oxo Stearic Acid 1 mg     3-oxo Octadecanoic Acid|β-keto Stearic Acid; 3-oxo-octadecanoic acid

S3I-201 5 mg     2-hydroxy-4-[[2-[[4-methylphenylsulfonyl]oxy]acetyl]amino]-benzoic acid; NSC 74859; S3I-201

DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 12-14 kDa     DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 12-14 kDa
13S-HODE 500 ug     13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadienoic acid; 13S-HODE

LB 42708 5 mg     [1-[[1-[4-bromopxenylmetxyl]-1H-imidazol-5-yl]metxyl]-4-1-naphthalenyl-1H-pyrrol-3-yl]-4-morpholinyl-metxanone

DiSC27 [3,3-Dietxylthiatricarboyenine iodide]     DiSC27 [33-Dietxylthiatricarboyenine iodide]

Dibutyl-3-xy7noxybutyl Phosphate 1 mg     dibutyl 3-xy7noxybutyl esterdibutyl 3-xy7noxybutyl ester-phosphoric acid; TBP-OH; Dibutyl-3-xy7noxybutyl Phosphate

Stearoyl Ethanolamide 50 mg     N-2-xy7noxyetxyl-octadec*; Ceramid|Stearic Acid Ethanolamide; Stearoyl Ethanolamide

3β,14-Dixy7noxy-5β,2022-bufadienolide, 5β,2022-Bufadienolide-3β,14-diol     Bufalin
HE瓊脂培養(yǎng)基23080250g用于沙門氏菌和某些志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-20034.22,GB/T4789.4-2003SN...

乳糖肉湯 (CM0137) Oxoid incubation media 乳糖肉湯 (CM0137) Oxoid

清酒酵母 /

TrypticSoyFastGreenAgar

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng)
MycoplasmaBrothMedium

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 250(g) incubation media 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 250(g)

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA) 250g 用于水或食品中大腸菌群平板菌落計數(shù)(GB 4789.3-2010SN0169-92)

四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB)用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)

產(chǎn)氣莢膜梭菌測定用培養(yǎng)基 250g 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)
dNTP 溶液,2.5mM5mL運輸Fraser肉湯增菌液(FB)基礎(chǔ)26080250g用于李斯特氏的選擇性增菌培養(yǎng)(SN/T0-2005,ISO標(biāo)準(zhǔn))。

Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ) (CM0275) Oxoid incubation media Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ) (CM0275) Oxoid

沙門氏菌IV /

接觸皿培養(yǎng)基250g用于生產(chǎn)環(huán)境的菌落總數(shù)檢測

EnrichmentbrothmediumE

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