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更新時間:2017-07-17 13:02:40瀏覽次數:87次
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MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL價格使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數的 PCR(循環(huán)數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL價格產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL價格DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL價格詳細說明書:
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2 (5 mg) 9,15-dioxo-11。alpha。-hydroxy-prost-5Z-en-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGE2; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin E2
Desmethylene Paroxetine (hydrochloride) (5 mg) 4-[[(3S,4R)-4-(4-fluorophenyl)-3-piperidinyl]methoxy]-1,2-benzenediol, monohydrochloride
五水流二氫鉀(5KG) potewwium Phosphate Monobasic, Anhydrous, 8--8; ≥99%
4(Z),7(Z),10(Z),13(Z)-Hexadecatetraenoic Acid-d5 (100 ug) (4Z,7Z,10Z,13Z)-hexadeca-4,7,10,13-tetraenoic-15,15’,16,16,16-d5 acid; 4(Z),7(Z),10(Z),13(Z)-Hexadecatetraenoic Acid-d5
AAPH (1 g) 2,2’-azobis-2-methyl-propanimidamide, dihydrochloride; AAPH
7-((4-((3-ethynylphenyl)amino)-7-methoxyinoneazolin-6-yl)oxy)-N-hydroxyhept* CUDC-101
PRIMA-1 (50 mg) 2,2-bis(hydroxymethyl)-3-quinuclidinone; PRIMA-1
PPQ-102 (50 mg) 6,7-dihydro-7,9-dimethyl-6-(5-methyl-2-furanyl)-11-phenyl-Pyrimido[4’,5’:3,4]pyrrolo[1,2-a]quinoxaline-8,10(5H,9)-dione
FKGK 11 (5 mg) 1,1,1,2,2-pentafluoro-7-phenyl-3-heptanone; FKGK 11
(S)-Dibutyl 3-Hydroxybutyl Phosphate (1 mg) (S)-TBP-OH; (S)-dibutyl (3-hydroxybutyl) phosphate
Phenylmethylsulfonyl fluoride (5 g) benzenemethanesulfonyl fluoride; PMSF|NSC 88499|Benzylsulfonyl fluoride; Phenylmethylsulfonyl fluoride
DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 6-8 kDa DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 6-8 kDa
9-OxoODE (50 ug) 9-oxo-10E,12Z-octadecadienoic acid; 9-KODE; 9-OxoODE
PF-04620110 (5 mg) trans-4-[4-(4-amino-7,8-dixy7no-5-oxopyrimido[5,4-f][1,4]oxazepin-6(5H)-yl)pxenyl]-cyclohexaneacetic acid
Rhod-FF, AM Rhod-FF, AM
Palmiaidic Acid (50 mg) (9E)-hexadecenoic acid; 9-trans-Hexadecenoic acid; Palmiaidic Acid
Dihomo-γ-Linolenic Acid (500 mg) 8Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; DGLA; Dihomo-γ-Linolenic Acid
Benzylpenicillin wo7ium salt Penicillin G wo7ium
AntibioticAgar
乳糖膽鹽培養(yǎng)基 1000(g) incubation media 乳糖膽鹽培養(yǎng)基 1000(g)
科瑪嘉大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml/瓶
GC瓊脂250用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)incubationmediaGC瓊脂250用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)
CHOMediumBase
改良Y培養(yǎng)基250g用于分離小腸結腸炎耶爾森氏菌
葡萄糖半固體培養(yǎng)基 Dextrose Semisolid Medium 用于志賀氏菌的復合生化試驗(GB標準)
去氧膽酸 Deoxycholic acid 10克 BR,99%,有害品
雙歧桿菌生化管用基礎培養(yǎng)基瓶雙歧桿菌糖發(fā)酵生化試驗incubationmedia雙歧桿菌生化管用基礎培養(yǎng)基瓶雙歧桿菌糖發(fā)酵生化試驗
PresenceAbsenceBroth
MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL價格MIOMedium
BCPMediumwith0.2%SolubleStarch
*卵黃多粘菌素瓊脂基礎(MYP) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 250 用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數(GB.SN標準)
Stuart*250g/瓶用于致病菌標本的采集、運輸和保存incubationmediaStuart*250g/瓶用于致病菌標本的采集、運輸和保存
BloodAgarPlates
MgSO4溶液,10mM,PCR 級5mL價格變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合
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