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細菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實驗方法

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更新時間:2017-07-10 12:34:22瀏覽次數(shù):658次

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細菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實驗方法IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標簽)

大鼠腎足突細胞*培養(yǎng)基 100mL

ANGPTL4 Others Human ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照)

AE-1雜交瘤細胞抗AChE AE-1 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 滅活血清

神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化)) 5×106cells/瓶×2 球狀少突細胞培養(yǎng)基OsM

細菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C

CMA1 Others Human CMA1 / Chymase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

草魚腎細胞;GIK

T24細胞,膀胱移行細胞癌細胞 子宮高分化鱗癌細胞,HCC細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0908

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755

SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照)
DNASE1 Others Human DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]

CL-0384MDA-MB-468-06(人癌細胞)5×106cells/瓶×2

Mv1Lu細胞,貂肺上皮細胞 人紅白細胞白血病細胞,HEL細胞 人皮膚成纖維細胞;HSAS4

鯉魚尾鰭細胞;YZ16

NBL1 Others Human DAN 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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Mousehiston-H2bELISAKit小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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HumanPlaet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAKit人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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