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更新時間:2017-07-10 12:34:07瀏覽次數(shù):434次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T免費(fèi)代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T免費(fèi)代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
IGFBP6 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
ENPP5 Others Human 人 ENPP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BRL 3A大鼠肝細(xì)胞 Rat hepatic cells BRL 3A DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM
CL-0329Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CNDP1 Others Mouse 小鼠 CNDP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Psi2 DAP mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
IL1B Protein Mouse 重組小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白
NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A10(大鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞)
CD7 Others Rat 大鼠 CD7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EL4.IL-2細(xì)胞,小鼠淋巴瘤細(xì)胞 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞) 人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2
CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Sf-21(昆蟲細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒 ,英文名: HCAM ELISA Kit
人神經(jīng)氨酸酶(NA)ELISA檢測試劑盒Humanneuraminidase,NAELISAKit 96T/48T
大鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)免疫試劑盒 Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit
英文名稱RatAquaporin1ELISAKit大鼠水通道蛋白1(AQP1)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
化妝品糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitVPI人血管活性肽酶抑制劑規(guī)格:48T/96T
人抑瘤素M(OSM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human transferrin receptor (TFR/CD71) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
Humanthymidinephosphorylase,TPELISAKit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInterleukin16,IL-16ELISA試劑盒人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
HumanIntestinaltrefoilfactor,ITFELISAKit人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T免費(fèi)代測大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠D-乳酸(D-LAC/D-LA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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