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更新時(shí)間:2017-07-10 12:33:48瀏覽次數(shù):439次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
支原體膜蛋白提取試劑盒50T使用說(shuō)明書IGFBP6 Protein Human 重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
MR1 [derivative of HB-11048]中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048] Chinese hamster X mouse B lymphocyte hybridoma RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
腎皮層上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HBE(人支氣管上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基CM
支原體膜蛋白提取試劑盒50T使用說(shuō)明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
支原體膜蛋白提取試劑盒50T使用說(shuō)明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
支原體膜蛋白提取試劑盒50T使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
卵巢上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CNDP2 Others Human 人 CNDP2 / CPGL / PEPA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞;MC3T3-E1
AAV-293細(xì)胞,胚腎細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,HCC-9724細(xì)胞 CL-0168Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24
IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞RNAHDMEC miRNA5 μg
家兔腎細(xì)胞;RABK3
HIC細(xì)胞,人小腸癌細(xì)胞系 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞,U2OS-Luc teT-on細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T]
HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒 ,英文名: PGDS ELISA Kit
人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCobravenomneuronalprotectivefactor,CVNPFELISAKit 96T/48T
魚熱休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)免疫試劑盒 Fish Heat shock protein HSP 90-alpha,HSP90AA1 ELISA kit
CLIAKitforPF-4/CXCL4ELISAKit大鼠血小板因子4規(guī)格:48T/96T
食物碳水化合物比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitCRH人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素規(guī)格:48T/96T
人*(AP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat tissue factor pathway inhibitor (TFPI) ELISA Kit 大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒
Humansolubleprotein185,sp185/HER-2ELISAKit 人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInterleukin13,IL-13ELISA試劑盒人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定性檢測(cè)試劑盒20次
Humanintrinsicfactorantibody,IFAELISAKit人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
支原體膜蛋白提取試劑盒50T使用說(shuō)明書大鼠I型前膠原羧基端肽(PICP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠FMS樣酪酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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