當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 漿蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T使用說明書
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更新時間:2017-07-10 12:31:05瀏覽次數(shù):187次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)漿蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
漿蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
漿蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
C7 Others Human 人 C7 / Complement component 7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
L6大鼠成肌細(xì)胞 L6 rat skeletal myoblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
心房肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
G-401(人腎癌Wilms細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腦膜細(xì)胞MMenC
人腦膜細(xì)胞總RNAHMC tRNA
CNTN1 Others Mouse 小鼠 Contactin 1 / CNTN1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E
SFPAC-1細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞 人舌癌細(xì)胞系,Tca8113-P60細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2
J82(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
IGFBP6 Others Mouse 小鼠 IGFBP6 / IBP-6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒裂解物HDF-n L
C2C12 小鼠成肌細(xì)胞
CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞
人胚腎細(xì)胞(SV40T基因修飾);293T/17 人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠肝素蛋白聚糖2(HSPG2)ELISA試劑盒 ,英文名: HSPG2 ELISA Kit
人神經(jīng)降壓素(NT)ELISA檢測試劑盒HumanNeurotensin,NISAKit 96T/48T
大鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒 Rat Carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit
英文名稱MMP-1金屬基質(zhì)蛋白酶-1規(guī)格:96T/48T
副溶血性弧菌Vibrioparahaemolyticus)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次
ELISAKitNE人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶規(guī)格:48T/96T
人幽門螺旋桿菌熱休克蛋白60(HP-HSP60)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Major histocompatibility complex class III (MHC III /HLA- III) ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒
Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISAKit 人黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humaninterferon-inducibleprotein10,IP-10ELISA試劑盒人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*(arginine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
HumanJo-1Antibody,Jo1/HRSELISAKit人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
漿蛋白提取試劑盒(無去垢劑)50T使用說明書大鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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