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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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Pepstatin 5mg使用說明書

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更新時間:2017-07-10 12:23:12瀏覽次數(shù):149次

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Pepstatin 5mg使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
Pepstatin 5mg使用說明書注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
FGF14 Protein Human 重組人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)

大鼠直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

NTRK2 Others Rat 大鼠 TrkB / NTRK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細(xì)胞 BHK-21 [C-13] hamster kidney fibroblast cells MEM培養(yǎng)基10%FBS

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生HEK-n

BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞HIMEC
人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90

COLEC12 Others Rat 大鼠 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0323BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞,NTERA-2細(xì)胞 Beta-TC-6(小鼠胰腺癌beta細(xì)胞)

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;M619

CD200R1 Others Human CD200R1 / CD200R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BMPR1B Others Human BMPR1B / ALK-6 (149-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1

CM-R070大鼠尿道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 胚肺細(xì)胞,HLF細(xì)胞 Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌細(xì)胞)

小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2

RTN4R Others Mouse 小鼠 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠膽囊收縮素B受體(CCKBR)ELISA試劑盒 ,英文名: CCKBR ELISA Kit

人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA檢測試劑盒Humanmyelinprotein2,p2ELISAKit 96T/48T

大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)免疫試劑盒 Rat mothers against decapentaplegic homolog 4,Smad4 ELISA Kit

英文名稱RatActininαELISAKit大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(Actininα)規(guī)格:96T/48T

酵母菌YPD培養(yǎng)基100毫升

ELISAKitHPRI人胎盤核糖核酸抑止劑規(guī)格:48T/96T
人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human noradrenaline bitartas (NE-B) ELISA Kit 人重*(NE-B)ELISA試劑盒

HumanBladdertumorantigen,BTAELISAKit 人膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織脊髓過氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感(DTNB)比色法定量檢測試劑盒20

HumanLaminin,LNELISAKit人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Pepstatin 5mg使用說明書大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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