Aprotinin 5mg實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Aprotinin 5mg實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Aprotinin 5mg實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白

大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

293T/17人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293T/17 DMEM+10%FBS

人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞HLEC

BEL-7405(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人真皮成纖維母細(xì)胞-新生HDF-n
CM-M023小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

CPA2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase A2 / CPA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

小鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

97H人肝癌細(xì)胞 97H human hepatocarcinoma cells DMEM+10%FBS

IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H838 [H838](人肺癌細(xì)胞)
CD99 Others Rat 大鼠 CD99 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1

人子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

C127細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 Y1(腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞) 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5

CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標(biāo)簽)

RKO(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠骨鈣素(OC)ELISA試劑盒 ，英文名： OC ELISA Kit

人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanneuropeptideY,NP-YELISAKit 96T/48T

大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒 Rat acidic fibroblast growth factor,aFGF/FGF-1 ELISA Kit

英文名稱RatEpithelialneutrophilactivatingpeptide-78ELISAKit大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽(ENA-78)規(guī)格：96T/48T

環(huán)境無機(jī)磷/游離磷酸根離子比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitTI-Ag人胸腺非依賴性抗原規(guī)格：48T/96T
人孕酮受體(PGR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human tumor vascular endothelial growth factor (TAF) ELISA Kit 人血管生長(zhǎng)因子(TAF)ELISA試劑盒

HumanBH3interactingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISA試劑盒人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

HumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Aprotinin 5mg實(shí)驗(yàn)方法大鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠促甲狀腺激素(TSH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝