總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

JB6-C30細(xì)胞，小鼠皮膚細(xì)胞 J82(膀胱癌細(xì)胞) 犬腎細(xì)胞;MDCK/IgR

人骨骼肌成肌細(xì)胞裂解物HSkMML

CAL-27(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml
小鼠淋巴瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1)

CTRC Others Human 人 CTRC / chymotrypsin C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

Calu-6 人退行性癌細(xì)胞

PANC-1人胰腺癌細(xì)胞 Human pancreatic cancer cell line PANC-1 DMEM+10% FBS

壞死因子

人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HAEC)( 5×105 ) BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 Rattus
CNTFR Others Rat 大鼠 CNTFR / CNTFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人小氣道上皮細(xì)胞HSAEpiC

豬腎細(xì)胞;PK-15

R 1610細(xì)胞，中國倉鼠體細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,PC-3細(xì)胞 CM-R101大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3

IL4R Others Human 人 IL4R / CD124 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠白介素3(IL3)ELISA試劑盒 ，英文名： IL3 ELISA Kit

人*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA檢測試劑盒HumanRetinolbindingprotein,RBPELISAKit 96T/48T

大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)免疫試劑盒 Rat anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit

英文名稱RatC5aELISAKit大鼠補(bǔ)體片斷C5a(C5a)規(guī)格：96T/48T

酒類氨熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitBRCA-1人癌易感蛋白1規(guī)格：48T/96T
人特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human progesterone receptor (PGR) ELISA Kit 人孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒

humanPepsinogenA,PG-AELISAKit 人*原A(PG-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISA試劑盒人高速泳動(dòng)蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實(shí)驗(yàn)方法大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝