當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法
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更新時間:2017-07-10 10:23:13瀏覽次數(shù):191次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)
人腦靜脈血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
BSC-1細胞,猴腎細胞系 CHRF(人巨核細胞白血病) 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
人結(jié)膜細胞裂解物HConFL
BC-022(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠漿細胞瘤;MPC-11
真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
人導(dǎo)管癌細胞;ZR-75-1
CTSD Others Human 人 Cathepsin D / CTSD 人細胞裂解液 (陽性對照)
DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細胞
CMVECs微血管內(nèi)皮細胞 CMVECs micro vascular endothelial cells DMEM+10%FBS
TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽)
人小梁網(wǎng)細胞(HTMC)(5×105) 3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞 Mouse
PARP3 Others Human 人 PARP-3 / PARP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人小腦顆粒細胞總RNAHCGC tRNA
大鼠骨髓瘤細胞;Y3-Ag 1.2.3
QG-56細胞,肺扁平上皮癌細胞 人口腔上皮癌長春新堿耐藥株,KB/V細胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2
小鼠腹水瘤細胞;S-180
IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠二肽基肽酶8(DPP8)ELISA試劑盒 ,英文名: DPP8 ELISA Kit
人視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA檢測試劑盒Humanretinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit 96T/48T
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)免疫試劑盒 Rat Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA Kit
英文名稱Ratanti-thrombinreceptorELISAKit大鼠抗*受體(ATR)規(guī)格:96T/48T
甲酸化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50次
人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISAKit人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISAKit,48T/96T人未磷酸化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T
人重去甲(NE-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human protamine (Protamine) ELISA Kit 人*(Protamine)ELISA試劑盒
HumanSquamousCellCarcinomaAntigen2,SCCAg2ELISAKit 人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanhexokinase3,HK3ELISA試劑盒人己糖激酶3(HK3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織過氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanLymeIgGELISAKit人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法大鼠*受體(TR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*抗*復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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