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更新時(shí)間:2017-07-10 10:22:55瀏覽次數(shù):202次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
真菌蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)50T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
真菌蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)50T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
真菌蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)50T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)
人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
GPNMB Others Mouse 小鼠 GPNMB / Osteoactivin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
COS-6細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 A375(人類惡性黑色素瘤) 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1
人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓裂解物HMSC-bm L
BC-021(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP
CL-0397NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CTSH Others Mouse 小鼠 Cathepsin H / CTSH 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪總RNAHMSC-ad tRNA
羊源細(xì)胞 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,HUVEC細(xì)胞 15P-1細(xì)胞,轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞
人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-1
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人小腦顆粒細(xì)胞裂解物HCGCL
人晶狀體上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
NRK-52E細(xì)胞,大鼠腎細(xì)胞 HEL(紅白血病細(xì)胞) 豬腎細(xì)胞;PK-15
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 / EFL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
D283 Med(人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人嗜肺軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)免疫試劑盒 Human Legionella pneumophila antigen,LP Ag ELISA Kit
mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Ratβ-Defensins,β-DFELISA試劑盒大鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmalondialchehyche,MDAELISA試劑盒人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit人過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人重組激活基因1(RAG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human inducible nitric oxide synthase (iNOS) ELISA Kit 人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
HumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISAKit 人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/anti-RA33-antibody,hnRNP/RA33ELISA試劑盒人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織過(guò)氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
humanlymphocyteantigen6complexlocusA,Ly6aELISAKit人淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)50T免費(fèi)代測(cè)大鼠*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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