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更新時間:2017-07-10 10:22:42瀏覽次數(shù):168次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)真菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
真菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
真菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)
人腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD24 Others Mouse 小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
COS-1細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 T-24(膀胱變移細(xì)胞癌) 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF
人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HUAECL
BC-020(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠子細(xì)胞;U14
人上皮細(xì)胞總RNAHMEpiC tRNA
CTSL1 Others Mouse 小鼠 CTSL / Cathepsin-L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HCT-15 人結(jié)腸癌細(xì)胞
CL-0401NCI-H446(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD276 Others Human 人 CD276 / B7-H3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人小腦顆粒細(xì)胞HCGC
L929 小鼠成纖維細(xì)胞
CM-H043人肝實質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y 人牙周膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)ELISA試劑盒 ,英文名: DHODH ELISA Kit
人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA檢測試劑盒HumanChromogranin,CgAELISAKit 96T/48T
大鼠前列腺素H2(PGH2)免疫試劑盒 Rat Prostaglandin H2,PGH2 ELISA Kit
英文名稱Ratanti-thrombinreceptorELISAKit大鼠抗*受體(ATR)規(guī)格:96T/48T
鉀離子膜通道轉(zhuǎn)運(yùn)功能檢測試劑盒20次
ELISAKitCpG-ODN人未甲基化寡聚脫氧核苷酸規(guī)格:48T/96T
人重組激活基因2(RAG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human free fatty acids (FFA) ELISA Kit 人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒
HumanGastrointestinalcancerMarker-CA199ELISAKit 人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHerpessimplexvirusⅠantibody,HSVⅠAbELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
HumanlymphocytefactorELISAKit人淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T使用說明書大鼠皮質(zhì)/上腺(CORT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*(Cortisol)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*IX(FIX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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