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更新時間:2017-07-10 10:21:32瀏覽次數:147次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網真菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T 實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
真菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T 實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標簽)
人表皮角質形成細胞*培養(yǎng)基 100mL
TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照)
ZA6細胞,轉S9基因倉鼠卵巢細胞 WI-38(人二倍體胚肺細胞) 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
人神經束膜細胞cDNAHPC cDNA
BC-009(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎足細胞;Mouse podocyte
CL-0143Lncap clone FGC(人前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
CTSZ Others Human 人 CTSZ 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
K7M2 wt [K7M2-WT]小鼠骨肉瘤成骨細胞 K7M2 wt [K7M2-WT] murine osteosarcoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
IL6 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL6 / Interleukin-6 蛋白
RL1(大鼠肺成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2 JAR(胚絨毛癌細胞)
PPBP Others Cynomolgus 食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 人細胞裂解液 (陽性對照)
人小梁網細胞總RNAHTMC tRNA
人血管內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
L13T3細胞,小鼠脂肪細胞 A9(皮下結締組織細胞) 小鼠前胃癌細胞;MFC
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
THP-1(人髓系白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠成肌細胞;C2C12
小鼠白介素2受體β(IL2Rβ)ELISA試劑盒 ,英文名: IL2Rβ ELISA Kit
人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)ELISA檢測試劑盒HumancyclophilinB,CyPBELISAKit 96T/48T
大鼠抗環(huán)胍氨酸肽抗體(Anti-CCP-antibody)免疫試劑盒 Rat Anti-Cyclic Citrullinated Peptide Antibody(Anti-CCP-antibody)ELISA Kit
英文名稱RatC4aELISAKit大鼠補體片斷C4a(C4a)規(guī)格:96T/48T
酒類丙三醇比色法定量檢測試劑盒20次
人癌標志物-CA153ELISAKit人癌標志物-CA153ELISAKit,48T/96T人癌標志物-CA153ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T
人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human free hemoglobin (f-Hb) ELISA Kit 人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒
Humanovariancancermarker-CA125ELISAKit 人卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHerpessimplexvirus2,HSV-Ag2ELISA試劑盒人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織果糖-1,6-二磷酸醛縮酶(ALD)定量檢測試劑盒20次
Humanlymphocytefunctionassociatedantigen3,LFA-3ELISAKit人淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)100T 實驗方法大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 96T/48T 組裝/原裝
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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