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更新時(shí)間:2017-07-10 10:19:35瀏覽次數(shù):149次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書(shū)
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說(shuō)明書(shū)
藻類(lèi)膜蛋白提取試劑盒(2D電泳)100T使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
藻類(lèi)膜蛋白提取試劑盒(2D電泳)100T使用說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
L929細(xì)胞,小鼠肺成纖維細(xì)胞 SGC7901(胃腺癌細(xì)胞) 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6
人腎系膜細(xì)胞cDNAHRMC cDNA
801-D (人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3
CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
NEI-H209細(xì)胞,小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,22RV1細(xì)胞 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞RNAHCPF miRNA5 μg
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B
ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CLEC7A Others Human 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HML
人胃癌細(xì)胞;MKN-45
小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02 透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 Human
PLA2G1B Others Human 人 PLA2G1B / PLA2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人受體TNFRSF結(jié)合**激酶2(RIPK2)免疫試劑盒 human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2,RIPK2 ELISA Kit
MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Ratα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/HLAⅠELISA試劑盒人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human free female three alcohol (FE3) ELISA Kit 人游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒
Humanhepaticlipase,HLELISAKit 人肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanHepatitisDvirusIgM,HDVIgMELISA試劑盒人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*過(guò)氧化物酶(GSHPX)活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
藻類(lèi)膜蛋白提取試劑盒(2D電泳)100T使用說(shuō)明書(shū)大鼠神經(jīng)激肽A(NKA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*狀腺原酸(T3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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