凍存細(xì)胞蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

C2C12細(xì)胞，鼠肌原細(xì)胞 H08910(卵巢癌細(xì)胞) 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1

人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞cDNAHASMC cDNA

ZR-75-30(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2

凍存細(xì)胞蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
凍存細(xì)胞蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
凍存細(xì)胞蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

U-373MG人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS

IL1B Protein Rabbit 重組兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白

NCI-H358(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人纖維環(huán)細(xì)胞HAFC

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6

大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106 肺腺癌細(xì)胞，LTEP-a-2細(xì)胞 MSCS細(xì)胞，猴的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

PANC-1, 人胰腺癌細(xì)胞 Human

IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人受體型*蛋白磷酸酶樣N(PTPRN)免疫試劑盒 Human PTPRN ELISA Kit

MouseFibrinogen,FbgELISAKit小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Ratα1-microglobulin,α1-MGELISA試劑盒大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanpeptidylprolylisomerase(cyclophilin)-like1,PPIL1ELISAKit人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human Helicobacter pylori IgG (Hp-IgG) ELISA Kit 人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒

Humananti-livercytosolantibodytype1,LC1ELISAKit 人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISA試劑盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織*S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
凍存細(xì)胞蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法大鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠上腺素(EPI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝