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更新時間:2017-07-10 10:18:44瀏覽次數(shù):107次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)
真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細胞裂解液 (陽性對照)
WB-F344細胞,大鼠肝上皮樣干細胞 HL-60(白血病原髓細胞) 大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞cDNAHRPEpiC cDNA
ZR-75-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 C3H/An小鼠結(jié)締組織細胞(L929-TK-);LTK-
人腎系膜細胞cDNAHRMC cDNA
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照)
人軟骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
L929細胞,小鼠肺成纖維細胞 SGC7901(胃腺癌細胞) 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞;C6
EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)
801-D (人巨細胞性肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11
大鼠淋巴纖維細胞(RLF)(5×105)
人無色素睫狀上皮細胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg
非洲綠猴腎細胞;CV-1
615小鼠網(wǎng)織細胞性白血病瘤株;L615 小鼠腎足突細胞*培養(yǎng)基 100mL
人絨毛膜毛細血管內(nèi)皮細胞 Human
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠抗*(AT)ELISA試劑盒 ,英文名: AT ELISA Kit
人瘦素(LEP)ELISA檢測試劑盒HumanLeptin,LEPELISAkit 96T/48T
Corticosteroid(*)免疫試劑盒 Corticosteroid ELISA Kit
CLIAKitforNTX(HumancrosslinkedN-opeptideoftypeIcollagen)ELISAKit人Ⅰ型膠原N末端肽規(guī)格:48T/96T
體外非細胞系統(tǒng)細胞色素P450亞酶2B6(BUPROPION)活性高效液相色譜法(HPLC)定量檢測試劑盒20次
ELISAKitβ-hexosaminidaseA人β氨基己糖苷酶A規(guī)格:48T/96T
人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human Helicobacter pylori IgM (Hp-IgM) ELISA Kit 人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒
HumanheparincofactorⅡ,HCⅡELISAKit 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHepatitisCvirusIgG,HCV-IgGELISA試劑盒人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAKit人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
血液蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T免費代測大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠素(Renin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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