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更新時間:2017-07-10 10:14:33瀏覽次數(shù):93次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)透析袋,截留分子量50KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 免費(fèi)代測注意事項
(1)本試劑只適用于實(shí)驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
透析袋,截留分子量50KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 免費(fèi)代測實(shí)驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司透析袋,截留分子量50KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白
人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Vero細(xì)胞,綠猴腎細(xì)胞 RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞總RNAHCSMC tRNA
U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤細(xì)胞;EL4
人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHUAEC tRNA
DDC Others Mouse 小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞;LCS5
GBC-SD細(xì)胞,膽囊癌細(xì)胞 *系,WI-38細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1
AMICA1 Others Human 人 JAML / AMICA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
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CM-R034大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SGC-7901/VCR細(xì)胞,人耐VCR胃腺癌細(xì)胞 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,BT-325細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7
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大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶2(UGT2) ELISA試劑盒 96T/48T 96T/48T 組裝/原裝
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MouseFactorⅧ-relatedAntigen,FⅧAgELISAKit小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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People of heterogeneous ribonucleoprotein complex (hnRNP/RA3 / anti RA33 antibody 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA3
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組織元素比色法定量檢測試劑盒20次
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量50KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 免費(fèi)代測大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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