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更新時(shí)間:2017-07-10 10:14:11瀏覽次數(shù):186次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
透析袋,截留分子量20KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
透析袋,截留分子量20KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 使用說(shuō)明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人骨骼肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BST1 Others Rat 大鼠 CD157 / BST1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CHO-AA8細(xì)胞,轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控含EGFP基因的CHO細(xì)胞 H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞) 615小鼠前胃癌瘤株;Fc
人小氣道上皮細(xì)胞總RNAHSAEpiC tRNA
U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS
表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB
DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / CD167 (aa 444-913) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0372KATO III(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) 人纖維肉瘤,HT-1080細(xì)胞 SW 900 [SW-900; SW900](人肺癌細(xì)胞)
人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]
PDPN Others Human 人 PDPN / Podoplanin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
IFNA4 Others Human 人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7
SW-13細(xì)胞,腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]
小鼠肝癌瘤株;H22
SPARC Others Human 人 SPARC / Osteonectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠25-羥基維生素D3(HVD3)ELISA試劑盒 ,英文名: HVD3 ELISA Kit
人雙氫睪酮(DHT)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanDihydrotestosterone,DHISAKit 96T/48T
大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS)免疫試劑盒 Rat Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit
CLIAKitforTSH(HumanThyroidStimulatingHormone)ELISAKit人促甲狀腺素規(guī)格:48T/96T
胚胎干細(xì)胞內(nèi)胚層(endoderm)細(xì)胞分化熒光檢測(cè)試劑盒10次
ELISAKitsCD146人可溶性CD146分子規(guī)格:48T/96T
人總蛋白(TP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human isocitrate dehydrogenase (ICD) ELISA Kit 人異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒
Humanmalondialchehyche,MDAELISAKit 人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanheparincofactorⅡ,HCⅡELISA試劑盒人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織高密度脂蛋白*(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量20KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 使用說(shuō)明書大鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠天門冬酸基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒 96T48T 試劑盒 組裝/原裝
我司透析袋,截留分子量20KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 使用說(shuō)明書本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
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