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更新時間:2017-07-10 10:13:06瀏覽次數(shù):106次
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1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標簽)
人脈絡膜血管細胞*培養(yǎng)基 100mL
JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 人細胞裂解液 (陽性對照)
CHL細胞,中國倉鼠肺細胞 NIH/3T3(胚胎成纖維細胞) 小鼠腎足細胞;Mouse podocyte
人肝臟星形細胞總RNAHHSteC tRNA
TSCCa(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肥大細胞瘤細胞;P815
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細胞裂解液 (陽性對照)
BIU-87 人淺表性膀胱癌細胞
97H-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人肝癌細胞 97H-EGFP-puro (lentiviral construct stable strain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
GDF10 Protein Mouse 重組小鼠 BMP-3b / GDF-10 蛋白 (Fc 標簽)
人前列腺上皮細胞(HPEpiC)(5×105) 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 Human
KDR Others Rat 大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細胞裂解液 (陽性對照)
人髓母細胞瘤細胞;D341Med
Balb/c小鼠骨髓間質(zhì)干細胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells
H4細胞,人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞(H4) 腸炎沙門氏菌 人心臟成纖維細胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg
SK-MEL-1(人皮膚黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 獼猴皮膚細胞;MMS7
大鼠*(UK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)免疫試劑盒 Human Varicella zoster virus IgG,VZV-IgG ELISA Kit
MouseEstriol,E3ELISAKit小鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
RatVitaminD2,VD2ELISA試劑盒大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISA試劑盒人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanPepsinogenA,PG-AELISAKit人*原A(PG-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人總鐵結(jié)合力(TIBC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human isoprenaline (iso-Hyd) ELISA Kit 人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒
HumanCollagenTypeⅣ,ColⅣELISAKIT 人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanheparansulfate,HSELISA試劑盒人類肝素(HS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織甘油三酯(triglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒20次
Humanmammaliantargetofrapamyein,mTORELISAKit人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 1卷,5M 免費代測大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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