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更新時(shí)間:2017-07-10 10:10:33瀏覽次數(shù):227次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
FCER1A Others Human 人 FcERI / FCER1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
3T3NIH細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 HUVEC(人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞) 小鼠垂體瘤細(xì)胞;GT1-1
人神經(jīng)元RNAHN miRNA5 μg
Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
人支氣管平滑肌細(xì)胞裂解物HBSMCL
DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠紅白血病細(xì)胞;MEL
LM3細(xì)胞,人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞 小鼠白血病細(xì)胞,M1細(xì)胞 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)
LTEP-a-2(人肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21160 Airway Epithelial Cell GrowthMedium KIT,呼吸道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml
IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5
A-375[A375]細(xì)胞,惡性黑色素瘤細(xì)胞 白血病細(xì)胞,Jurknt. Clone E6-1細(xì)胞 人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431]
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich
DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠骨成型蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒 ,英文名: BMP4 ELISA Kit
人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAquaporin2,AQP-2ELISAKit 96T/48T
大鼠*蛋白酶抑制劑alpha-1 免疫試劑盒 Rat serine protease inhibitor alpha 1 ELISA kit
英文名稱RatT3ELISAKit大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
活化蛋白C(APC)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitTS人胸苷酸合成酶規(guī)格:48T/96T
人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat lipoprotein associated phospholipase A2 (Lp-PL-A2) ELISA Kit 大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
HumanAspartateaminotransferase,GOT/GPISAKit 人天*轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
humanhemochromatosistype2/uvenile-umanhomolog,HFE2LISAKit人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織甘油-3-磷酸脫氫酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanmannosereceptor,MRELISAKit人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量3.5KD;直徑16mm;壓平寬度25mm 1卷,5M 使用說明書大鼠纖維粘連蛋白(FN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠纖溶酶原激活物抑制劑(PAI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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