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30%SDS 100ml實(shí)驗(yàn)方法

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30SDS 100ml實(shí)驗(yàn)方法CXCL9 Protein Human 重組人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

REG1A Others Rat 大鼠 REG1A / PSPS 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞 SRSV/3T3(SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞) 人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0903

RWPE1(人前列腺上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SMR3B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

30SDS 100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
30SDS 100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
30SDS 100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24

EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

頜下腺上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

P3HR1細(xì)胞,人EBV陽(yáng)性B淋巴瘤細(xì)胞 大鼠胰腺癌細(xì)胞株,DSL-6A/C1細(xì)胞 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-c cDNA

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CoC1(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE
EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞HRCEpiC

牛腎細(xì)胞;MDBK

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Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系 Human

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大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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Rattyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISA試劑盒大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域*激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

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HumanmembraneIgD,mIgDELISAKit人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
30SDS 100ml實(shí)驗(yàn)方法大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTRELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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