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更新時間:2017-07-10 09:56:40瀏覽次數(shù):106次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)改進型蛋白電泳考馬斯亮藍脫色液500ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
改進型蛋白電泳考馬斯亮藍脫色液500ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
改進型蛋白電泳考馬斯亮藍脫色液500ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CCL11 Protein Human 重組人 CCL11 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人胎盤羊膜細胞*培養(yǎng)基 100mL
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照)
SAC-II B2細胞,小鼠腹水瘤細胞 BRL 3A(大鼠肝細胞) 人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1
人結(jié)直腸癌細胞;T84
RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠心肌細胞MCM
EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2
NCI-H446細胞,人小細胞肺癌細胞 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞,C6細胞 CM-H111人成骨細胞*培養(yǎng)基100mL
P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-27438 Adipocyte Nutrition Medium, 脂肪細胞營養(yǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml
ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腎癌細胞;A498
CM-R042大鼠直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
SGC7901細胞,人低分化胃癌細胞 轉(zhuǎn)染了tk基因的SW038-C2細胞,SW038-C2-tk細胞 長尾綠猴腎細胞;4647
COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細胞) 5×106cells/瓶×2
CCL1 Others Human 人 CCL1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 96T/48T 組裝/原裝
人酸性鐵蛋白(AIF)免疫試劑盒 Human acidic isoferitin,AIF ELISA kit
組織及血液堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,TRAILR1ELISA試劑盒大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlowdensitylipoprotein,LDLELISA試劑盒人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanoxidizedlowdensitylipoproteinantibody,OLAbELISAKit人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human insulin like growth factor binding protein 3 (IGFBP-3) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒
Humanmonoamineoxidase,MAOELISAKit 人單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humangranulocytespecificantinuclearantibody,GS-ANAELISA試劑盒人粒細胞特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織短鏈乙酰乙酰輔酶A硫解酶(acetoacetyl-CoAthiolase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanMethylaseELISAKit人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
改進型蛋白電泳考馬斯亮藍脫色液500ml售后服務(wù)鵝褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝雙氫睪(DHT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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