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更新時間:2017-07-10 09:44:48瀏覽次數(shù):125次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Tris緩沖鹽溶液(20×TBS,pH8.0)500ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Tris緩沖鹽溶液(20×TBS,pH8.0)500ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
我司Tris緩沖鹽溶液(20×TBS,pH8.0)500ml免費代測本著標準*、質(zhì)量*、服務*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務,咨詢!
CCL21 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白
人小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人細胞裂解液 (陽性對照)
HFTF細胞,人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞 遲緩真桿菌/遲緩埃格特菌 小耳豬肺細胞;SEP-L2
小鼠胚胎成纖維細胞;MEF
P19(小鼠畸胎瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照)
雪旺氏細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細胞裂解液 (陽性對照)
正常大鼠腎細胞;NRK
WI-38細胞, 人胚肺細胞 小鼠肺成纖維細胞,L929細胞 CL-00025637(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2
SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
HDMEC-c 人真皮微血管內(nèi)皮細胞(HDMEC)來自少年者 500,000cells 肺微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人少突膠質(zhì)細胞
人前脂肪細胞-內(nèi)臟RNAHPA-v miRNA5 μg
兔主動脈平滑肌細胞;SMC 白血病細胞,L1210細胞 SH2細胞,小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA
HA Others H16N3 甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)免疫試劑盒 Human TREM-1 ELISA Kit
乙酰輔酶A(Acetyl-CoA)試劑盒 紫外分光 25管/24樣
RatTri-iodothyronine,T3ELISA試劑盒大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit人骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔補體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human islet amyloid polypeptide (IAPP) ELISA Kit 人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒
HumanSalmonellatyphiantigen,St-AgELISAKit 人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISA試劑盒人糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性比色法定量檢測試劑盒20次(10個樣本)
Humanmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAKit人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tris緩沖鹽溶液(20×TBS,pH8.0)500ml免費代測雞白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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