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更新時間:2017-07-10 09:41:28瀏覽次數(shù):976次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)ELISA終止液500ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
ELISA終止液500ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
ELISA終止液500ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
PPBP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人食管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
BPIFA2 Others Human 人 BPIFA2 / C20orf70 人細胞裂解液 (陽性對照)
7WML6.0細胞,人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株 生孢梭菌 狗肺成纖維樣細胞;DogL1
小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]
NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 人 APCDD1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人角膜上皮細胞RNAHCEpiC miRNA5 μg
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照)
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3
SW116細胞,人大腸癌細胞 人葡萄膜黑色素細胞,UM細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;Caco-2
Hep 3B(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
AGRP Others Human 人 AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD4 Others Ferret 雪貂 CD4 / Leu-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人少突膠質(zhì)前體細胞RNAHOPC miRNA5 μg
MHCC97-H 高轉(zhuǎn)移人肝癌細胞
CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
人胚肺細胞系;KuMA 人肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人羧甲基賴氨酸(CML)免疫試劑盒 Human Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit
考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 100管/96樣
RatTransformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipocalin2,LCN2ELISA試劑盒人細胞色素b561(cytb561)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanornithinecarbamoyltransferase,OCISAKit人*氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat amylin (Amylin) ELISA Kit 大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒
HumanEntamoebahistolyticaAntigenELISAKit 人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanGlutathioneperoxidase,GSH-PxELISA試劑盒人*過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織單胺氧化酶A型(MAO-A)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanMotilin,MTLELISAKit人血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISA終止液500ml使用說明書雞促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
雞促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝
雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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