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轉(zhuǎn)膜液(Western),尼龍膜500ml免費代測

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更新時間:2017-07-10 09:36:21瀏覽次數(shù):124次

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轉(zhuǎn)膜液(Western,尼龍膜500ml免費代測CXCL13 Protein Canine 重組狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人前列腺平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

U251細(xì)胞,人星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞 痢疾志賀氏菌 二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-

大鼠肝細(xì)胞;IAR20

NAMALWA(Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

轉(zhuǎn)膜液(Western,尼龍膜500ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
轉(zhuǎn)膜液(Western,尼龍膜500ml免費代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
轉(zhuǎn)膜液(Western,尼龍膜500ml免費代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
主動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

ENPEP Others Human ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆); EPO-CHO-T

APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WPS1 胎盤絨毛癌細(xì)胞,JAR細(xì)胞 Sf-21細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞系

人羊膜細(xì)胞;WISH

HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CD93 Others Human CD93 / C1QR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;UACC812

MG-63 人成骨肉瘤細(xì)胞

SK-MES-1人肺鱗癌細(xì)胞 SK-MES-1 human lung squamous carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

EPO Protein Rat 重組大鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系);293T/17 人呼吸道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠Ⅱ型前膠原基端原肽(PNT)ELISA試劑盒 ,英文名: PNT ELISA Kit

人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA檢測試劑盒Humanplacentalribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit 96T/48T

大鼠泛素結(jié)合酶UBC5 免疫試劑盒 Rat ubiquitin-conjugating enzyme UBC5 ELISA Kit

CLIAKitforUFC(Humanurinaryfreecortisol)ELISAKit人尿游離*規(guī)格:48T/96T

尿液一氧化氮合成酶總活性比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKitsTNFαR人可溶性腫瘤壞死因子α受體規(guī)格:48T/96T
兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) ELISA Kit 人*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒

HumanEnterovirusELISAKit 人腸病毒(Enterovirus)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanglucokinase,GCKELISA試劑盒人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)活性比色法定量檢測試劑盒20

HumanmuscarinicacetylcholinereceptorM3,M-AChRM3ELISAKit人受體亞型M3(M-AChRM3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)膜液(Western,尼龍膜500ml免費代測雞*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

雞血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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