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更新時(shí)間:2017-07-10 09:32:47瀏覽次數(shù):99次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
我司昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
XCL1 Protein Canine 重組狗 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
HS-4細(xì)胞,人皮膚癌細(xì)胞系 鼠傷*Ta97 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21
ME-180(人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人肝永生化細(xì)胞;THLE-3
ENTPD2 Others Human 人 NTPDase 2 / ENTPD2 (aa 29-460) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0388NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,DU145細(xì)胞 SK-MES-1(人肺癌細(xì)胞)
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7
CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
AGO3 Others Human 人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人成纖維細(xì)胞裂解物HMFL
小鼠正常肝細(xì)胞;NCTC 1469 [NCTC1469]
MDA-MB-453細(xì)胞,癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE 450細(xì)胞 中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)ELISA試劑盒 ,英文名: vWA3A ELISA Kit
人肽聚糖(PG)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 96T/48T
大鼠透明質(zhì)酸酶1(HYAL1)免疫試劑盒 Rat Hyaluronidase-1,HYAL1 ELISA kit
英文名稱RatGlycogenphosphorylaseBBELISAKit大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GPBB)規(guī)格:96T/48T
化學(xué)發(fā)光分析20樣本
ELISAKitVEGFR-1人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1規(guī)格:48T/96T
兔*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat insulin like growth factor binding protein 3 (IGFBP-3) ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒
humancolicinELISAKit 人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanglialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNFELISA試劑盒人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織長(zhǎng)鏈烯脂酰輔酶A水合酶(ENOYLCOAHYDRATASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Humanmyogenin,MYOGELISAKit人肌細(xì)胞生成素(MYOG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
昆蟲蛋白快速提取試劑盒(離心柱法,2D電泳用)50T使用說明書綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
綿羊胰島素(Insulin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
綿羊血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
綿羊褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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