當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞增殖/毒性檢測>> CCK-8 反應(yīng)終止液500T免費代測
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更新時間:2017-07-06 09:01:04瀏覽次數(shù):190次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)CCK-8 反應(yīng)終止液500T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
CCK-8 反應(yīng)終止液500T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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WB-F344(大鼠肝上皮樣干細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H082人臍靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
PDCD1LG2 Others Cynomolgus 食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照)
CRL-2780細胞,人結(jié)腸癌細胞 人骨髓瘤細胞,3T3D細胞 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92 [NK92]
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0922
BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細胞裂解液 (陽性對照)
人少突膠質(zhì)前體細胞裂解物HOPCL
IL12A & IL12B Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺癌細胞;A-427 [A427]
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞 Mouse
CR2 Others Human 人 CD21 / CR2 / C3DR 人細胞裂解液 (陽性對照)
人卵巢成纖維細胞(HOF) ( 5×105 )
人T淋巴細胞白血病細胞;HuT 78
CM-R048大鼠腸巨噬細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠黑色素瘤細胞;B16 小鼠肝實質(zhì)細胞*培養(yǎng)基 100mL
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞 Mouse
ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)免疫試劑盒 Human ANGPTL3 ELISA Kit
人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒 ,英文名: LKM ELISA Kit
RatInterleukin1α,IL-1αELISA試劑盒大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlucosedependentinsulinreleasingpolypeptide,GIPELISA試劑盒人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin9,IL-9ELISAKit人白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat endothelial nitric oxide synthase (eNOS) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
Human2,3-dinorthromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanapoproteinB100,apo-B100ELISA試劑盒人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葉綠體總蛋白定量檢測試劑盒20次
HumanTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CCK-8 反應(yīng)終止液500T免費代測兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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