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更新時間:2017-07-06 09:00:48瀏覽次數(shù):142次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)真菌活性檢測試劑盒500T售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
真菌活性檢測試劑盒500T售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
EL4(小鼠淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H098人真皮微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細胞裂解液 (陽性對照)
BGC-803細胞,人胃癌細胞 人骨肉瘤細胞,HOS細胞 人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC
人癌細胞;MDA-MB-435S
BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照)
綿羊肺細胞;OAR-L1
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
IMR-32 人神經(jīng)母細胞瘤細胞
CEM/C1人急性淋巴細胞白血病細胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
VEGFA Protein Mouse 重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白
小鼠垂體細胞(MPC)(5×105) 5637, 人膀胱癌細胞 Human
BCAM Others Mouse 小鼠 BCAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細胞;Jurkat D,E
CW-2 人結(jié)腸癌細胞
HT-29人結(jié)腸癌細胞 HT-29 human colon cancer cells McCoy's 5a+10%FBS
TNFSF12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人虹狀體上皮細胞 (HIPEpiC)( 5×105 ) HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞 Human
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生成抑制因子(Arresten)免疫試劑盒 Human Arresten ELISA Kit
人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體-IgM(HIT)ELISA試劑盒 ,英文名: HIT ELISA Kit
RatInterleukin17,IL-17ELISA試劑盒大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglucokinase,GCKELISA試劑盒人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin6,IL-6ELISAKit人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
HumanThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanapoproteinA1,apo-A1ELISA試劑盒人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葉綠體外膜功能檢測試劑盒20次
HumanTNFrelatedactivationinducedcytokine,TRANCEELISAKit人壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌活性檢測試劑盒500T售后服務(wù)兔子可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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