真菌活性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
真菌活性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
真菌活性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
EAC(小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CM-H114人前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

CD4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

9811C11細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞 人骨肉瘤細(xì)胞,SW1353細(xì)胞 人胚胎心肌組織來源細(xì)胞;CCC-HEH-2

人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP

C2 Others Human 人 C2 / Complement Component 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

J82 人膀胱移行細(xì)胞癌

NCI-H716 [H716]人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白

小鼠中腦縫神經(jīng)細(xì)胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 Human
IGSF3 Others Human 人 IGSF3 / EWI-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1

NCI-H1395 人肺腺癌細(xì)胞

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

LGALS1 Protein Human 重組人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白

人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701] 人呼吸道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒 Human Bradykinin,BK ELISA Kit

人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒 ，英文名： LSP ELISA Kit

RatInterleukin16,IL-16ELISA試劑盒大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISA試劑盒人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanInterleukin5，IL-5ELISAKit人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒

Humanthrombospondin1,TSP-1ELISAKit 人血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanApolipoproteinE,Apo-EELISA試劑盒人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物葉綠體F型ATP酶(FtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

humantoll-likereceptor2,TLR2ELISAKit人toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌活性檢測試劑盒1000T免費(fèi)代測兔子腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝