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更新時間:2017-07-06 08:59:55瀏覽次數(shù):140次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞活性檢測試劑盒500T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞活性檢測試劑盒500T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞活性檢測試劑盒500T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
DU 145(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H122人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細胞裂解液 (陽性對照)
(+)9811細胞,人胃癌細胞 人骨肉瘤細胞,SP20細胞 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF
人腦瘤細胞;SF763
CA12 Others Mouse 小鼠 Ca12 / Car12 人細胞裂解液 (陽性對照)
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
JAR 人胎盤絨毛癌細胞
RWPE-1人正常前列腺上皮細胞 RWPE-1 of normal human prostate epithelial cells K-SFM+0.05mg/ml BPE+5ng/ml EGF
FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標簽)
小鼠神經(jīng)黑質(zhì)細胞(MN-sn)(1×106) T24, 人膀胱癌細胞 Human
人上皮細胞(HMEpiC) (5×105)
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)
CM-H120人神經(jīng)元細胞*培養(yǎng)基100mL
綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞;U14-GFP 小鼠肝星形細胞*培養(yǎng)基 100mL
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元 Rattus
EPHA7 Others Mouse 小鼠 EPHA7 / EHK-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A9 ELISA Kit
人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA檢測試劑盒HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T
大鼠黑色素細胞抗體(MC Ab)免疫試劑盒 Rat melanocyte antibody,MC Ab ELISA Kit
英文名稱Rat17-ANPELISAKit大鼠17-羥-孕同(17-ANP)規(guī)格:96T/48T
裂解液VII:細菌裂解溶液20/50次
ELISAKitENK人腦啡肽規(guī)格:48T/96T
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒
Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanApolipoproteinC3,ApoC3ELISA試劑盒人載脂蛋白C3(ApoC3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)20次
HumanToll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞活性檢測試劑盒500T使用說明書兔子皮質(zhì)/上腺(CORT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子*(Cortisol)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子*受體(TR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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