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更新時(shí)間:2017-07-06 08:59:13瀏覽次數(shù):146次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)血管通透性測(cè)試染色試劑盒20ml免費(fèi)代測(cè)
細(xì)胞骨架染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
LDH細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒-熒光1000T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
LDH細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒-熒光1000T免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Daudi(人淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CM-R010大鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
ICAM4 Others Human 人 ICAM4 / CD242 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
AGS細(xì)胞,人胃腺癌細(xì)胞 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞,HOPC-os細(xì)胞 恒河猴皮膚細(xì)胞;RM-S1
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-SH
CA14 Others Mouse 小鼠 CA14 / Car14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-bm
IL12B Others Marmoset 狨猴 IL12B / IL-12B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-
NCI-H1650細(xì)胞,人肺支氣管癌細(xì)胞 小鼠前列腺癌細(xì)胞,RM-1細(xì)胞 CM-R031大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Raji(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28050 DC Generation Medium, 樹突狀細(xì)胞生成培養(yǎng)基(即用型) 250ml
CTNNB1 Others Mouse 小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞 ICPB TR7[C-1;ICMP 8639;NCPPB 2626]細(xì)胞 CGM1(EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞)
人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB
SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)ELISA試劑盒 ,英文名: NAGα ELISA Kit
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanangiostatinELISAKit 96T/48T
大鼠胱天蛋白酶7(P7)免疫試劑盒 Rat Caspase-7,P7 ELISA kit
CLIAKitfor大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISAKit大鼠癌標(biāo)志物-CA153規(guī)格:48T/96T
磷酸二酯酶5A(Phosphodiesterase5A)0.25單位
ELISAKitIAP人免疫抑制酸性蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒
HumancoagulationfactorⅧrelatedantigen,FⅧ-AgELISAKit 人*Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanapelin12,AP12ELISA試劑盒人apelin12(AP12)ELISAKi規(guī)格:96T/48T
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次
HumanTotalproteinS,TPSELISAKit人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
LDH細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒-熒光1000T免費(fèi)代測(cè)兔子脫氫表雄酯(DHEA-S)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子*結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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